综合微生物的培养方法,包括以下步骤:
(1)前期准备:(A)灭菌处理;(B)制备Biolite水;(C)检查设备和材料;
(2)按比例配制培养材料;
(3)导入曝气,进行繁殖培养;
(4)取液观察;(a)取液;(b)稀释菌液;(c)平板培养;
(5)分离并检测;
(6)取液储存;通过该综合微生物培养方法简单可操作性强,培养的综合微生物均在3代以内,菌类稳定不发生突变,且繁殖快速。
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规格参数:
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
乳酸片球菌规格 | Pediococcus acidilactici | EY-J963215 |
资源名称: 乳酸片球菌
种属: Pediococcus acidilactici
分离基物: 发酵牦牛乳
提供形式: 冻干物
安全等级: 1
模式菌株: no
应用领域: 酸奶
培养基: MRS培养基:酪胨 10.0g,牛肉粉 8.0g,酵母粉 4.0 g,葡萄糖 20.0 g,镁 0.2 g,乙酸钠 5.0 g,柠檬酸三铵 2.0 g, 2.0 g,锰 0.05 g,吐温80 1.0 g,蒸馏水 1000mL。pH6.2±0.2。
生长条件: 37℃,兼性厌氧,3d
存储条件: 液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法
低温存法:
①简单保存法,将琼脂斜面孢子培养物、菌丝悬浮液以及由麸皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培养物置于4℃冰箱保存,保存时间不超过1~2个月,若将谷物原料制备的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蜡,以隔绝外界空气和水汽,保持时间可达3~4个月;②液氮超低温保存法,将生长稳定期的细胞悬浮在10%甘油或其他低冰点液体中,密封于安瓿管内,然后控制冷却速度,使安瓿管温度逐步下降至 -35℃时,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多数微生物如病毒、噬菌体、多种细菌、放线菌、酵母和原虫、特别是一些用冷冻干燥法有困难的微生物,都可用此法保存。
微生物菌种的培养:
⒈ 孢子制备
⑴ 放线菌孢子的制备
一般采用琼脂斜面培养基,培养基中含有一些适合产孢子的营养成分,如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1%,氮源不超过0.5%),碳源丰富容易造成酸性的营养环境,不利于放线菌孢子的形成,氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下,干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。放线菌斜面的培养温度大多数为28 ℃,少数为37 ℃,培养时间为5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制备
霉菌的孢子培养,一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖,而且这类培养基的表面积较大,可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25~28 ℃,培养时间为4~14天。
⒉ 种子制备
⑴ 摇瓶种子制备
摇瓶种子进罐,常采用母瓶、子瓶两级培养,有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和*,并易被菌体分解利用,氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓,子瓶培养基浓度比母瓶略高,更接近种子罐的培养基配方。
⑵ 种子罐种子制备
种子罐种子制备的工艺过程,因菌种不同而异,一般可分为一级种子、二级种子和三级种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中,经培养后形成大量的菌丝,这样的种子称为一级种子,把一级种子转入发酵罐内发酵,称为二级发酵。如果将一级种子接入体积较大的种子罐内,经过培养形成更多的菌丝,这样制备的种子称为二级种子,将二级种子转入发酵罐内发酵,称为三级发酵。同样道理,使用三级种子的发酵,称为四级发酵。
Serratia liquefaciens 中文名称:液化沙雷氏菌Serratia liquefaciens提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:yes应用领域:分类学研究,质量控制培养方法培养基:CM0002生长条件:30℃存储条件:真空冷冻干燥法 纯度:≥98% (HPLC)
Aspergillus nigerCMCC(F) 98003 中文名称:黑曲霉 Aspergillus nigerCMCC(F) 98003模式菌株:未知应用领域:0.5~1.0×10³cfu/颗 1颗/支 纯度:≥98% (HPLC)
Cryptococcus│albidus 中文名称:浅白隐球酵母Cryptococcus│albidus分离基物:复合饲料提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:饲料用。培养方法培养基:CM0077生长条件:28-30℃存储条件:定期移植法 纯度:97%
Torulopsis│globosa 中文名称:球拟圆酵母Torulopsis│globosa提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:食用酵母。培养方法培养基:CM0077生长条件:28-30℃存储条件:定期移植法 纯度:97%
Candida│gelidadi 中文名称:冻胶假丝酵母Candida│gelidadi分离基物:酒曲提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:用于曲酒增香。培养方法培养基:CM0077生长条件:28-30℃存储条件:定期移植法 纯度:97%
Torulopsis│dattila 中文名称:枣椰球拟酵母Torulopsis│dattila提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:以糖蜜为原料发酵酒精。培养方法培养基:CM0077生长条件:28-30℃存储条件:定期移植法 纯度:97%
Saccharomyces│chevalieri 中文名称:薛瓦酵母Saccharomyces│chevalieri分离基物:苹果李子提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:酿造李子酒。培养方法培养基:CM0077生长条件:28-30℃存储条件:定期移植法 纯度:95%
Candida│lipolytica var. lipolytica 中文名称:解酯假丝酵母解酯变种Candida│lipolytica var. lipolytica提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:石油发酵制柠檬及异柠檬。培养方法培养基:CM0077生长条件:28-30℃存储条件:定期移植法 纯度:95%
乳酸片球菌规格营养肉汤(NB)人星形胶质细胞原代上皮细胞特制基础培养基A Beta1-40 (H-3-me6;H-3-me13;H-3-me14; Beta-Amyloid 1-40) β淀样肽1-40(结构改造)
营养肉汤(NB)人星形胶质细胞原代内皮细胞特制基础培养基A Beta29-40( Beta-Amyloid 29-40) β淀样肽29-40(野生型)
营养琼脂(NA)人星形胶质细胞原代平滑肌细胞特制基础培养基A Beta29-42( Beta-Amyloid 29-42) β淀样肽29-42(野生型)
营养琼脂(NA)人小脑星形胶质细胞原代成纤维细胞特制基础培养基Beta-Amyloid (1-42) β淀样肽(1-42)
乳糖胆盐发酵培养基人脊髓星形胶质细胞原代心肌细胞特制基础培养基Amyloid Beta 25-35( Beta-Amyloid 25-35) β淀样肽25-35(多肽)
乳糖胆盐发酵培养基人海马星形胶质细胞原代表皮角化细胞特制基础培养基Beta-Amyloid 1-42 CT β淀样肽 1-42 (C端多肽)
乳糖复发酵培养基(乳糖发酵培养基)人脑干星形胶质细胞原代系膜细胞特制基础培养基Amylin 糖尿病相关肽(胰岛淀样肽)
乳糖复发酵培养基(乳糖发酵培养基)人中脑星形胶质细胞原代肝实质细胞特制基础培养基APP695-770 (Amyloid protein precursor) 淀样肽前体蛋白(多肽抗原)