公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究,作为实验项目研究。下列产品详细介绍:
产品名称 | 生长特性 | 货号 |
乳腺癌细胞;BC-024 | 贴壁生长 | EY-X63674 |
细胞名称 乳腺癌细胞;BC-024
形态特性: 上皮样细胞
生长特性: 贴壁生长
特征特性: BC-024乳腺癌细胞由中国人种乳腺癌组织经培养选择获得,于2007年建立鉴定,是乳腺癌基础研究和临床研究的材料。
培养条件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS;50u/ml试剂胰岛素
传代方法: 1:3传代,2-3天传一代
传代情况: C21
冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测: 阴性
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冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大?。?/span>
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
Crebanine
CAS No.:25127-29-1
中文名:克班宁
分子式:C20H21NO4
3O基没食子 订购|咨询 神经源素3(NEUROG3) 规格: 20mg
龙胆苦苷 订购|咨询 神经源素3(NEUROG3) 规格: 20mg
剑皂苷元 订购|咨询 神经颗粒素(NRGN) 规格: 20mg
络塞琳 订购|咨询 神经颗粒素(NRGN) 规格: 10mg
枸橼 订购|咨询 神经激肽A(NKA) 规格: 20mg
茴香脑 订购|咨询 神经激肽B(NKB) 规格: 20mg
莪术 订购|咨询 神经激肽B(NKB) 规格: 20mg
对香豆 订购|咨询 神经激肽B(NKB) 规格: 20mg
大黄素 订购|咨询 诱导型一氧合酶(NOS2) 规格: 20mg
柴胡皂苷A 订购|咨询 诱导型一氧合酶(NOS2) 规格: 20mg
扁桃 订购|咨询 诱导型一氧合酶(NOS2) 规格: 20mg
蝙蝠葛苷 订购|咨询 诱导型一氧合酶(NOS2) 规格: 10mg
订购|咨询 诱导型一氧合酶(NOS2) 规格: 20mg
补骨脂素 订购|咨询 绒毛蛋白1(VIL1) 规格: 20mg
莽草 订购|咨询 绒毛膜(CG) 规格: HPLC≥98%,20mg/vial
三七皂甙 R1 订购|咨询 绒毛膜α肽(CGα) 规格: HPLC≥98%;20mg/vial
大黄 订购|咨询 结合珠蛋白(Hpt) 规格: HPLC≥98%,20mg/vial
芦 订购|咨询 结合珠蛋白(Hpt) 规格: UV≥98%,20mg/vial
WNT7A 原癌基因wnt7a蛋白抗体 现货供应 0.1ml Enoxacin
BLK/MODY11 B淋巴细胞酪激酶抗体 现货供应 0.1ml Ofloxacin
COG1 COG1蛋白抗体 现货供应 0.1ml Ofloxacin
BAP31 BAP31蛋白抗体 现货供应 0.1ml Abacavir
ADORA1/Adenosine A1 Receptor 腺苷A1受体抗体 现货供应 0.1ml Abacavir
SDHB 铬细胞瘤患者抑癌基因SDHB抗体 现货供应 0.1ml Nicotinamide
ApoER2 载脂蛋白E2受体抗体 现货供应 0.1ml Nicotinamide
CRMP1 二氢嘧啶酶相关蛋白1抗体 现货供应 0.1ml Cyproterone acetate
葡萄糖脱氢酶 进口、国产 英文名称:GlucoseDehydrogenase 含量:BR,98%
葡萄糖酶 进口、国产 英文名称:Glucoseoxidase 含量:BR,50u/mg
葡萄籽提取物 进口、国产 英文名称:GrapeSeedExtract 含量:AR,99%
蒲桃 进口、国产 英文名称:Pimelicacid 含量:高纯,99%
普钙 进口、国产 英文名称:Calciumhypophosphitemonohydrate 含量:CP,99%
七水合二 进口、国产 英文名称:SSodiumphosphatedibasicheptahydrate 含量:CP
七缩五硼铵 进口、国产 英文名称:Ammoniumpentaborate 含量:CP,98%
漆酶 进口、国产 英文名称:LaccasefromRhusvernificera 含量:BR,5u/ul
汽巴蓝F3GA 进口、国产 英文名称:CibacronBlueF3GA 含量:高纯
铅白 进口、国产 英文名称:Lead(II)carbonate 含量:CP,95%
乳腺癌细胞;BC-024营养琼脂斜面规格:250g用途:用于细菌的纯化培养
改良Skirrow氏肉汤规格:FBP溶液用途:1ml每支含量
改良Skirrow琼脂添加剂规格:1ml*5支用途:每支添加于100ml改良Skirrow氏肉汤中
改良BPLS琼脂规格:250g用途:用于各种标本中沙门氏菌选择性分离培养(ISO标准)
乳菌/双歧杆菌显色培养基规格:1000ml用途:用于乳菌/双歧杆菌的显色培养
Bolton肉汤规格:250g用途:用于空肠弯曲菌的增菌(GB标准)
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除细胞消化液。加入含血清的 *细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除细胞消化液后,加入含血清的*培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。