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产品名称 | 大蹄蝠皮肤细胞;GRBS1 |
生长特性 | 贴壁生长 |
货号 | EY-X63721 |
细胞名称 大蹄蝠皮肤细胞;GRBS1
形态特性: 成纤维样细胞
生长特性: 贴壁生长
特征特性: 该细胞来源于一雄性大蹄蝠的皮肤组织。中国科学院昆明细胞库于2004年建立。
培养条件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)15%NBS
传代方法: 1:2传代;3-4天一次
传代情况: P2
冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测: 荧光法(-)
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产品特点:
1、 使用方便:不需昂贵设备。
2、 可以处理各种细菌菌体,包括新鲜菌液和冰冻菌体。
3、 将蛋白提取的时间缩短至30分钟-1小时。
4、 采用温和的中性裂解组分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。
6、 紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。
7、 蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂;每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本试剂盒中不有EDTA,与金属螯和层析等兼容。
培养操作步骤 :
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
操作流程:
1.1主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生的细胞,以0.25%消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生的细胞用消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。
8-(1,1-Dimethyl-2-propenyl)-3'-methoxykaempferol
CAS No.:1859979-00-2
中文名:
分子式:C21H20O7
6基24环基三嗪 对照 订购|咨询 粘脂蛋白2(MCOLN2) 规格: 200mg
地美唑 对照品 订购|咨询 粘脂蛋白3(MCOLN3) 规格: 200mg;99.9%
肝表面(HBs)抗体血浆国家标准品 订购|咨询 粘着斑激酶(FAK) 规格: 1.3IU/支,0.5ml/支
;Levodopa 订购|咨询 粘蛋白1(MUC1) 规格: 50mg
异连翘酯苷A;Isoforsythias 订购|咨询 粘蛋白1(MUC1) 规格: 20mg
异李素3O半乳糖苷;Isorha 订购|咨询 粘蛋白1(MUC1) 规格: 10mg
3基乳香 ;alphabosw 订购|咨询 粘蛋白1(MUC1) 规格: 20mg
原人参三;Protopanaxatri 订购|咨询 粘蛋白12(MUC12) 规格: 20mg
g莶精;Darutigel 订购|咨询 粘蛋白13(MUC13) 规格: 20mg
小豆蔻明;cardamonin 订购|咨询 粘蛋白17(MUC17) 规格: 20mg
;Aconitine 订购|咨询 粘蛋白2(MUC2) 规格: 20mg
1脱氧野尻;1Deoxyji 订购|咨询 粘蛋白2(MUC2) 规格: 20mg
山麦冬皂苷B;Liriopesides 订购|咨询 粘蛋白2(MUC2) 规格: 20mg
斯皮诺素;Spisin 订购|咨询 粘蛋白20(MUC20) 规格: 20mg
人参炔;Falcaril,Pana 订购|咨询 粘蛋白21(MUC21) 规格: 20mg
七叶皂苷 IIb;Escin IIb 订购|咨询 粘蛋白3(MUC3) 规格: 10mg
23羟基白桦;Anemosapoge 订购|咨询 粘蛋白4(MUC4) 规格: 20mg
青藤;Simenine 订购|咨询 粘蛋白4(MUC4) 规格: 20mg
Laminin Beta 2/Laminin S 层粘连蛋白β2抗体 现货供应 0.2ml Asulam
Plakophilin 1 桥粒斑菲素蛋白1抗体 现货供应 0.2ml Bepotastine besilate
phosphoALK/CD246(Tyr1604) 间变型淋巴瘤激酶抗体 现货供应 0.1ml Sodium copper chlorophyllin
phosphoALK/CD246(Tyr1278/1282/1283) 间变型淋巴瘤激酶抗体 现货供应 0.1ml Neochlorogenic acid
phosphoALK/CD246(Tyr1586) 间变型淋巴瘤激酶抗体 现货供应 0.1ml Ivabradine HCl
SMOC2 分泌模块钙结合蛋白2抗体(平滑肌相关蛋白2) 现货供应 0.2ml Xanthophyll
Sprouty 2 快速发育生长因子同源蛋白2抗体 现货供应 0.1ml Xanthophyll
THSD1 血小板跨膜反应蛋白1抗体 现货供应 0.2ml Xanthophyll
进口、国产 英文名称:DOX 含量:BR
进口、国产 英文名称:Lomefloxacinhydrochloride 含量:BR,500%
甘叔丁酯 进口、国产 英文名称:Glycinetertbutylesterhydrochloride 含量:BR,98%
甘酯 进口、国产 英文名称:GlycineethylesterHC1 含量:BR,98.5%
环胞啶 进口、国产 英文名称:CycloC 含量:试剂级,99%
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缓冲液 进口、国产 英文名称:PotassiumchlorideHydrochloricacidBuffersolution 含量:BR,98%
邻二 进口、国产 英文名称:OPDHC1 含量:BR,98%
林肯 进口、国产 英文名称:Lincomycinhydrochloride 含量:BR,150IU/mg
进口、国产 英文名称:VB1 含量:BS
大蹄蝠皮肤细胞;GRBS1新生霉素50ug规格:50ug/支*5用途:作为添加剂使用
BM固体培养基规格:250g用途:用于醋钙不动杆菌增菌培养
脱纤维羊血规格:50ml用途:每100ml HBPM0251中加入7ml脱纤维羊血
假单胞cfc选择性培养基添加剂规格:1ml/支*5用途:每支添加于200ml HB8689中
2216E液体培养基规格:250g用途:用于海生细菌的培养
新生霉素(125ug/支)规格:1ml/支*5用途:每支添加于225ml志贺氏增菌肉汤-新生霉素中