公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究,作为实验项目研究。下列产品详细介绍:
产品名称 | 生长特性 | 货号 |
胚肾二倍体细胞;HEK-2 | 贴壁生长 | EY-X63719 |
细胞名称 胚肾二倍体细胞;HEK-2
形态特性: 上皮细胞样
生长特性: 贴壁生长
特征特性: 该细胞系来自一女性胎儿的正常肾组织。中国科学院昆明细胞库于1986年建立。
培养条件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS
传代方法: 1:2传代;3-4天一次
传代情况: P4
冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测: 荧光法(-)
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冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
8-(1,1-Dimethyl-2-propenyl)kaempferol
CAS No.:142646-43-3
中文名:
分子式:C20H18O6
东莨菪内酯 订购|咨询 脱氧核糖核酶Ⅰ(DNASE1) 规格: 20mg
川芎嗪 订购|咨询 脱氧核糖核酶Ⅰ(DNASE1) 规格: 30mg
瑞芬太 订购|咨询 脱氧核糖核酶Ⅰ样2(DNASE1L2) 规格: 20mg
冰 订购|咨询 脱氧核糖核酶Ⅰ样2(DNASE1L2) 规格: 200mg
哆醛 订购|咨询 脱氧核糖核酶Ⅱ(DNASEⅡ) 规格: 100mg
藤黄微球菌 订购|咨询 脱氧核糖核酶Ⅹ(DNASEⅩ) 规格: 冻干粉
罗卡因 订购|咨询 脱氧胸苷激酶(DTYMK) 规格: 100mg
L 订购|咨询 脱氧辅蛋白合酶(DHPS) 规格: 100mg
(R,S)告依春 订购|咨询 脱氧辅蛋白羟酶/单加氧酶(DOHH) 规格: 20mg
庆大C1a 订购|咨询 脲酰酶β(UPβ1) 规格: 50mg
菝葜皂苷元 订购|咨询 猫眼综合征染色体区候选基因1(CECR1) 规格: 20mg
烟 订购|咨询 减数分裂抑制因子1(MEI1) 规格: 100mg
曲美他嗪 订购|咨询 减数分裂重组蛋白5(MEI5) 规格: 100mg
三 订购|咨询 旋光蛋白(OPTC) 规格: 100mg
广防已 订购|咨询 旋转蛋白(RTTN) 规格: 3g
奈福泮 订购|咨询 着丝粒蛋白32(CENP32) 规格: 100mg
鹅去氧胆 订购|咨询 着丝粒蛋白36(CENP36) 规格: 30mg
金 订购|咨询 着丝粒蛋白B(CENPB) 规格: 200mg
phosphoBACH1/BRIP1(Ser990) 癌易感基因相互作用蛋白1抗体 现货供应 0.1ml Pentabromophenyl ether
Adenylate Kinase 1/AK1 腺苷激酶1抗体 现货供应 0.2ml 3Amino3azabicyclo[3.3.0]octane hydrochloride
CTNNBIP1 β链接素相互作用蛋白1抗体 现货供应 0.1ml Kasugamycin
phosphoCTNNBIP1 (Ser36) β链接素相互作用蛋白1抗体 现货供应 0.1ml Tulathromycin A
phosphoCTNNBIP1 (Thr43/Ser50) β链接素相互作用蛋白1抗体 现货供应 0.1ml Tulathromycin A
AKR1D1 醛固还原酶家族1成员D1抗体 现货供应 0.2ml Latamoxef sodium
ALDH1B1 脱氢酶5抗体 现货供应 0.1ml Procyanidin
ALDOB 醛缩酶2抗体 现货供应 0.1ml Procyanidin
DL精 进口、国产 英文名称:DLArginineHC1 含量:BR,99%
D甲酯 进口、国产 英文名称:DAlanineMethylEsterHydrochloride 含量:BR,98%
D甘露糖 进口、国产 英文名称:DMannosamineHC1 含量:高纯,98%
D酪甲酯 进口、国产 英文名称:DTyrosineMethylesterhydrochloride 含量:ACS,98%
L甲酯 进口、国产 英文名称:LAlaninemethylesterhydrochloride 含量:BR,98%
L酪甲酯 进口、国产 英文名称:LTyrosinemethylesterhydrochloride 含量:ACS,98%
N,N二甲基 进口、国产 英文名称:N,NDimethylglycinehydrochloride 含量:BR
Na甲酰L精酯 进口、国产 英文名称:BAEE 含量:BR,98%
黄 进口、国产 英文名称:Acriflavinehydrochloride 含量:BR,99%
进口、国产 英文名称:Acridinehydrochloride 含量:AR,99%
胚肾二倍体细胞;HEK-2硝盐肉汤规格:250g用途:用于蜡样芽孢杆菌硝盐还原试验(SN标准)
醇类中和增菌培养基(带棉签)规格:10ml*20/盒用途:主要用于含有醇类消剂样品的增菌培养
亮绿乳糖胆盐培养基(BGB)规格:250g用途:用于饮用天然矿泉水中大肠杆菌的检验(GB标准)
七叶苷(进口)规格:10g用途:微生物指示剂
哥伦比亚血琼脂基础(改良)规格:250g用途:用于链球菌等苛求菌培养
改良GAM琼脂规格:250g用途:用于脆弱抑杆菌的分离培养
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除细胞消化液。加入含血清的 *细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除细胞消化液后,加入含血清的*培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。