公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究,作为实验项目研究。下列产品详细介绍:
产品名称 | 生长特性 | 货号 |
胚肺二倍体细胞;HEL-1 | 贴壁生长 | EY-X63718 |
细胞名称 胚肺二倍体细胞;HEL-1
形态特性: 成纤维细胞样
生长特性: 贴壁生长
特征特性: 该细胞系来自一男性胎儿的正常肺组织,1986年由中国科学院昆明细胞库建立。
培养条件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS
传代方法: 1:2传代;3-4天一次
传代情况: P5
冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测: 荧光法(-)
?
冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
3,5,7-Trihydroxy-8-methoxyflavone
CAS No.:5928-42-7
中文名:3-羟基汉黄芩素
分子式:C16H12O6
17氢9去氢内酯19 订购|咨询 脯酰羧肽酶(PRCP) 规格: 20mg
芒柄花素 订购|咨询 脯/丝丰富卷曲螺旋蛋白1(PSRC1) 规格: 20mg
异托铵 订购|咨询 脯/精丰富端亮丰富重复蛋白(PRELP) 规格: 100mg
桂 订购|咨询 脯4羟酶α多肽Ⅰ(P4Hα1) 规格: 0.5g
订购|咨询 脯丰富蛋白4(PRR4) 规格: 100mg
龙眼 订购|咨询 脯脱氢酶2(PRODH2) 规格: 1g
地尔 订购|咨询 脱中胚蛋白(EOMES) 规格: 50mg
磺 订购|咨询 脱氢表雄(DHEA) 规格: 1000mg
正十九 订购|咨询 脱氢酶(XDH) 规格: 0.2ml
牻牛儿(马) 订购|咨询 脱氢酶(XDH) 规格: 20mg
异 订购|咨询 脱氢酶(XDH) 规格: 100mg
蔓荆子黄素 订购|咨询 脱氢酶(XDH) 规格: 20mg
披草 订购|咨询 脱铁转铁蛋白(apoTf) 规格: 0.5g
高丽红参 订购|咨询 脱氧鸟苷激酶(DGUOK) 规格: 6g
氧槐果 订购|咨询 脱氧(DPD) 规格: 20mg
甘木通 订购|咨询 脱氧尿苷三酶(DUT) 规格: 3g
地 订购|咨询 脱氧胞苷激酶(DCK) 规格: 50mg
订购|咨询 脱氧核糖核酶Ⅰ(DNASE1) 规格: 50mg
PARP4 多腺苷二多聚酶4抗体/多聚ADP核糖聚合酶4 现货供应 0.2ml sulphadoxine
DOCK1 细胞质分裂付出蛋白1抗体 现货供应 0.2ml sulphadoxine
EDA2R/TNFRSF27 肿瘤坏死因子受体超家族成员27抗体 现货供应 0.2ml Penicillin G, sodium salt
EDG1/CD363/S1P1 内皮细胞分鞘脂G蛋白偶联受体1抗体 现货供应 0.2ml Penicillin G, sodium salt
FEM 1B FEM1B抗体 现货供应 0.2ml Mitiglinide calcium Hydrate
AIF 调亡诱导因子抗体 现货供应 0.1ml Mitiglinide calcium Hydrate
BACH1/BRIP1 癌易感基因相互作用蛋白1抗体 现货供应 0.1ml Propylthiouracil
AIMP2 AIMP2抗体 现货供应 0.2ml Fluorometholone Acetate
亚麻油 进口、国产 英文名称:Linolenicacid 含量:AR,98%
亚铅粉 进口、国产 英文名称:Zinc 含量:AR,99%
亚基R 进口、国产 英文名称:NitrosoRsalt 含量:BS
亚基胲 进口、国产 英文名称:Acetaldoxime 含量:AR,99%
烟 进口、国产 英文名称:VB3 含量:BS
烟酰 进口、国产 英文名称:VPP 含量:高纯
烟酰腺嘌呤二核苷四 进口、国产 英文名称:TPNH2Na4 含量:BR,2u/ul
延胡索 进口、国产 英文名称:TMEDA 含量:高纯,99%
基性碳铜 进口、国产 英文名称:Cupricsubcarbonate 含量:CP,99%
O酰左旋肉 进口、国产 英文名称:ALCAR 含量:BR,98%
胚肺二倍体细胞;HEL-1三糖铁琼脂培养基(TSI)规格:BR250g详情介绍
培养基C(EP标准)规格:250g用途:用于抗生素效价测定
新生霉素规格:4.5mg/支*5用途:每支加入225ml HB0147或HB0147-1或HB0148中
蜡样芽孢杆菌成套生化鉴定管(LYGB)规格:7种*2套/盒*5盒用途:用于蜡样芽孢杆菌的生化鉴定。
麦康凯肌醇阿东醇羧卞琼脂(MZAC)规格:250g用途:用于食品中克雷伯氏菌分离培养
醇类中和增菌培养基规格:9ml*20/盒用途:主要用于含有醇类消剂样品的增菌培养
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除细胞消化液。加入含血清的 *细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除细胞消化液后,加入含血清的*培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。