公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究,作为实验项目研究。下列产品详细介绍:
产品名称 | 生长特性 | 货号 |
高背鲫鱼尾鳍细胞;GBJd | 贴壁生长 | EY-X63716 |
细胞名称 高背鲫鱼尾鳍细胞;GBJd
形态特性: 成纤维细胞样
生长特性: 贴壁生长
特征特性: 该细胞系来源于一高背鲫鱼(滇池)的尾鳍组织。1985年由中国科学院昆明细胞库建立。
培养条件: M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS
传代方法: 1:2传代;7-10天一次
传代情况: P8
冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测: 荧光法(-)
?
冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
2''-O-E-p-Coumaroylafzelin
CAS No.:151455-10-6
中文名:2"-O-对香豆酰阿福豆苷
分子式:C30H26O12
桑白皮对照药材 订购|咨询 唾液结合Ig样凝集素8(SIGLEC8) 规格: 1g
紫杉肽 订购|咨询 唾液酶2(SIAL2) 规格: 20mg
诃子鞣质(97%) 订购|咨询 唾液酶4(SIAL4) 规格: 10mg
订购|咨询 铜伴侣超氧物歧酶(SOD4) 规格: 20mg
蝙蝠葛苏林 订购|咨询 铜伴侣超氧物歧酶(SOD4) 规格: 10mg
胆 订购|咨询 铜转运蛋白1(COPT1) 规格: 20mg
檀香 订购|咨询 铜转运蛋白2(COPT2) 规格: 20mg
补骨脂 订购|咨询 铜离子转运ATP酶β肽(ATP7β) 规格: 20mg
珍珠母 订购|咨询 铜离子转运ATP酶β肽(ATP7β) 规格: 0.5g
新补骨脂异黄 订购|咨询 铜蓝蛋白(CP) 规格: 20mg
澳洲茄 订购|咨询 铜蓝蛋白(CP) 规格: 20mg
东莨菪 订购|咨询 铜蓝蛋白(CP) 规格: 50mg
曲奈德 订购|咨询 犁鼻1受体1(VN1R1) 规格: 100mg
羟基积雪草苷 订购|咨询 犁鼻1受体2(VN1R2) 规格: 20mg
订购|咨询 犁鼻1受体3(VN1R3) 规格: 20mg
天名精 订购|咨询 犁鼻1受体4(VN1R4) 规格: 1g
川木香(川木香) 订购|咨询 犁鼻1受体5(VN1R5) 规格: 2g
蜘蛛香 订购|咨询 偶对蛋白(SYMPK) 规格: 1g
APOL6 载脂蛋白样蛋白6抗体 现货供应 0.2ml Silodosin
ARTS 凋亡相关蛋白TGFb信号抗体 现货供应 0.2ml Silodosin
Bif Bax相互作用因子1抗体 现货供应 0.2ml Brimonidine tartrate
CLIC4 细胞内离子通道蛋白4抗体 现货供应 0.2ml Brimonidine tartrate
PLSCR3 脂爬行酶3抗体 现货供应 0.2ml Imatinib
PNPT1 多核苷酶蛋白抗体 现货供应 0.2ml Aliskiren Inter5
AIF 调亡诱导因子抗体 现货供应 0.1ml GHKcu/Growthmodulating peptide
phosphoAXL (Tyr698+Tyr702+Tyr703) 粘附相关激酶抗体 现货供应 0.1ml Triamterene
红 进口、国产 英文名称:BCP,Na 含量:超纯,99%
蓝 进口、国产 英文名称:Bromocresolgreen 含量:BR,95%
蓝 进口、国产 英文名称:Bromocresolgreensodiumsalt 含量:BR,90%
绿甲基红指示剂粉枕 进口、国产 英文名称:MethylRedmixedindicatorpowder 含量:BR,95%
绿甲基红指示剂溶液 进口、国产 英文名称:MethylRedmixedindicatorsolution 含量:BR,98
脲苷 进口、国产 英文名称:BDU 含量:BR,98%
蓝 进口、国产 英文名称:BTB 含量:BR,98%
钾 进口、国产 英文名称:Potassiumbromate 含量:AR,70%
进口、国产 英文名称:Bronorol 含量:AR,99%
雪腐镰刀 进口、国产 英文名称:NIV 含量:BR,96%
高背鲫鱼尾鳍细胞;GBJd抗生素检定培养基Ⅶ规格:BR250g详情介绍
麦芽糖(脑膜炎奈瑟氏菌)规格:20ml/支详情介绍
PH7.0化钠-蛋白胨缓冲液(2015药典)规格:250g用途:用于样品制备的营养液
KF链球菌肉汤规格:1%TT溶液用途:0.01g每支含量
梭菌增菌培养基规格:250g用途:用于梭菌增菌培养
MIU规格:40%尿素水用途:5ml每支含量
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除细胞消化液。加入含血清的 *细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除细胞消化液后,加入含血清的*培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。