产品特点:
1、 使用方便:不需昂贵设备。
2、 可以处理各种细菌菌体,包括新鲜菌液和冰冻菌体。
3、 将蛋白提取的时间缩短至30分钟-1小时。
4、 采用温和的中性裂解组分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。
6、 紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。
7、 蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂;每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本试剂盒中不有EDTA,与金属螯和层析等兼容。
细胞名称 横纹肌肉瘤细胞;A-673[A673]
形态特性: 成纤维细胞
生长特性: 贴壁生长
特征特性: A-673是源自15岁女性的横纹肌肉瘤。它在软琼脂上形成,在免疫抑制血清处理的小鼠中成瘤。有四个以上的标志染色体,一个额外的F染色体和两个异常的B染色体。
培养条件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)胎牛血清,10%
传代方法: 消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况: PN5
冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测: 阴性
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产品名称 | 横纹肌肉瘤细胞;A-673[A673] |
生长特性 | 贴壁生长 |
货号 | EY-X63529 |
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分产品现货,超低比价,产品名称货期短,价格优,售后齐全。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
操作流程:
1.1主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生的细胞,以0.25%消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生的细胞用消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。
培养操作步骤 :
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用Boc-Arg(Pbf)-OHHuman Thrombospondin 3 ELISA Kit
小鼠杂交瘤;hnRNP B1 A10拉丁属名: Hirsula minnesotensisBoc-Arg(Pbf)-OHHuman SIRT7(NAD-dependent deacetylase sirtuin-7) ELISA Kit
杂交瘤;6A2用途: 代谢产物具有抗细菌活性。3,3-二苯基-1-Human TINP1 ELISA Kit
杂交瘤;SU-211-10拉丁属名: Bacillus beijingensis3,3-二苯基-1-Human TIP47 ELISA Kit
杂交瘤;S-200-23拉丁属名: Aspergillus oryzae2,4-二巯基嘧啶Human TIMM13 ELISA Kit
杂交瘤;S-171-9拉丁属名: Nocardioides sp.2,4-二巯基嘧啶Human TIP30 ELISA Kit
杂交瘤;S-290-3注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用乙盐酸盐Human TIPIN ELISA Kit
杂交瘤;S-145-9用途: 分类、研究,具有用作耐重金属基因资源潜力。乙盐酸盐Human TIMM17A ELISA Kit
杂交瘤;S-98-10拉丁属名: Escherichia coli乙盐酸盐Human TIMM17B ELISA Kit
杂交瘤;Bcsp31-1F1拉丁属名: Pseudarthrobacter siccitoleransN6-甲基-2'-脱氧腺苷Human FLNC(Filamin-C) ELISA Kit
鼠源杂交瘤;AV1F1拉丁属名: Pseudomonas frederiksbergensis2-溴-3-(三氟甲基)苯乙酮Human TJAP1 ELISA Kit
横纹肌肉瘤细胞;A-673[A673]人(Cortisol)ELISA试剂盒PLGFELISAkit产品规格:48T/96T。
人促甲状腺素(TSH)ELISA试剂盒PLGFELISAkit产品规格:48T/96T。
人孕激素/孕(PROG)ELISA试剂盒PLPELISAKit产品规格:48T/96T。
人雌激素(E)ELISA试剂盒pMHCELISAKit产品规格:48T/96T。
人促生长激素释放激素(GHRH)ELISA试剂盒PMNElastaseELISAKit产品规格:48T/96T。
人双氢睾(DHT)ELISA试剂盒PM-Scl/PM-1ELISAKit产品规格:48T/96T。
人血栓素B2(TXB2)ELISA试剂盒PNAELISAKit产品规格:48T/96T。
人促甲状腺素释放激素(TRH)ELISA试剂盒PNPELISAKit产品规格:48T/96T。