公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究,作为实验项目研究。下列产品详细介绍:
产品名称 | 生长特性 | 货号 |
胎盘绒膜癌细胞;BeWo | 贴壁生长 | EY-X63318 |
细胞名称 胎盘绒膜癌细胞;BeWo
形态特性: 上皮样
生长特性: 贴壁生长
特征特性: 取自人绒癌脑转移组织,在仓鼠颊囊移植传代8年。利用移植瘤组织进行体外培养,建立细胞系。利用不同传代方法建立了不同亚系,JEG-3是其衍生。该细胞可以产生雌激素、孕激素、雌酮、雌二醇、雌三醇、hCG、胎盘催乳素、角蛋白。
培养条件: F12:Ham'sF12NutrientMixture10%FBS
传代方法: 1:3传代;3~4天换液1次。
传代情况: C4
冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测: 培养法(-)
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冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大?。?/span>
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
鼠源杂交瘤细胞;AV1F1形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 半贴壁生长Anti-ST3GAL4 Polyclonal Antibody
杂交瘤细胞14A3;11B6形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 半贴壁生长Anti-SLC6A4 Polyclonal Antibody
抗T淋巴细胞单克隆抗体杂交瘤细胞;CD3形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 半贴壁生长Anti-PLAT Polyclonal Antibody
杂交瘤细胞;Bcsp31-1F1形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 半贴壁生长Anti-FAS Polyclonal Antibody
杂交瘤细胞;S-98-10形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 半贴壁生长Anti-STAT6 Polyclonal Antibody
杂交瘤细胞;S-290-3形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 半贴壁生长Anti-CRYAA Polyclonal Antibody
杂交瘤细胞;S-171-9形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 半贴壁生长Anti-PHF21A Polyclonal Antibody
杂交瘤细胞;S-145-9形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 半贴壁生长Alexa Fluor 488标记的羊抗大鼠IgG
杂交瘤细胞;S-200-23形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 半贴壁生长Anti-LTA4H Polyclonal Antibody
杂交瘤细胞;S-200-23形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 半贴壁生长Anti-CAPN2 Polyclonal Antibody
杂交瘤细胞;SU-211-10形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 半贴壁生长Anti-RAF1 Polyclonal Antibody
人肝癌细胞;CSQT-1形态特性: 上皮细胞样生长特性: 贴壁生长Anti-TMED10 Polyclonal Antibody
杂交瘤细胞;6A2形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 半贴壁生长Anti-APOBEC3G Polyclonal Antibody
杂交瘤细胞;2C6A6形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 半贴壁生长Anti-PDX1 Polyclonal Antibody
杂交瘤细胞;Jurkat-LTRGT形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 半贴壁生长Anti-AAAS Polyclonal Antibody
杂交瘤细胞;whiov-P24C-MoAb形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 半贴壁生长Anti-ACTA2 Polyclonal Antibody
胎盘绒膜癌细胞;BeWo大鼠肾上腺素(EPI)ELISA试剂盒DTELISAKit产品规格:48T/96T。
大鼠克拉拉细胞蛋白(CC16)ELISA试剂盒DUBELISAKit产品规格:48T/96T。
大鼠肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)ELISA试剂盒DUTPELISAKit产品规格:48T/96T。
大鼠牛小肠性磷酶(CIAP)ELISA试剂盒DVD/DHVD3ELISAKit产品规格:48T/96T。
大鼠全段甲状旁腺素(i-PTH)ELISA试剂盒DynELISAKit产品规格:48T/96T。
大鼠抗内皮细胞抗体(AECA)ELISA试剂盒E1/UBAEELISAKit产品规格:48T/96T。
大鼠膜联蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)ELISA试剂盒E2/UBCEELISAKit产品规格:48T/96T。
大鼠肾素(Renin)ELISA试剂盒E2ELISAKit产品规格:48T/96T。
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除细胞消化液。加入含血清的 *细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除细胞消化液后,加入含血清的*培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。