细胞名称 表达SV40T和EBNA1的人胚肾细胞；293ET
形态特性: 上皮样；多角
生长特性: 贴壁生长
特征特性: 该细胞来源于293细胞，可以表达SV40T和EBNA1。
培养条件: IMDM:Iscove'sModiefiedDulbecco'sMedium10%FBS
传代方法: 1:6传代；2天1次
传代情况: 不详
冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测: 培养法（-）
公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究，作为实验项目研究。下列产品详细介绍：
产品名称 | 生长特性 | 货号 |
表达SV40T和EBNA1的人胚肾细胞；293ET | 贴壁生长 | EY-X63316 |
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冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除细胞消化液。加入含血清的 *细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除细胞消化液后，加入含血清的*培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
人Ph+急淋白血病细胞系；SUP-B15形态特性: 淋巴母细胞生长特性: 悬浮生长Anti-TRAF3 Polyclonal Antibody
人套细胞淋巴瘤细胞；JeKo-1形态特性: 淋巴母细胞生长特性: 悬浮生长Anti-Phospho-RAF1-S259 Polyclonal Antibody
人肺癌细胞；Calu-1形态特性: 上皮细胞生长特性: 贴壁生长Anti-TIMP1 Polyclonal Antibody
人小细胞肺癌细胞；NCI-H446形态特性: 上皮样生长特性: 贴壁/悬浮生长，混合Anti-AQP3 Polyclonal Antibody
人肺腺癌细胞；NCI-H1975形态特性: 上皮样生长特性: 贴壁生长Anti-FAH Polyclonal Antibody
人绒毛膜癌细胞；JEG-3形态特性: 上皮细胞样生长特性: 贴壁生长Anti-FXR1 Polyclonal Antibody
人内膜癌细胞；RL95-2形态特性: 上皮细胞生长特性: 贴壁生长Anti-IKK alpha Polyclonal Antibody
人肾细胞腺癌细胞；ACHN形态特性: 上皮细胞生长特性: 贴壁生长Anti-APG4B Polyclonal Antibody
人红白血病细胞；Kasumi-1形态特性: 原粒细胞生长特性: 悬浮生长Anti-TNFRSF11B Polyclonal Antibody
人神经母细胞瘤细胞；SK-N-BE(2)形态特性: 神经母细胞生长特性: 贴壁生长Anti-BE1 Polyclonal Antibody
人胰腺癌细胞系；SW1990形态特性: 上皮细胞生长特性: 贴壁生长Anti-Desmin Polyclonal Antibody
人大细胞肺癌细胞；NCI-H460[H460]形态特性: 上皮样生长特性: 贴壁生长Anti-VCAM1 Polyclonal Antibody
人T淋巴细胞白血病细胞；HuT78形态特性: 淋巴母细胞生长特性: 悬浮生长Anti-PLAUR PolycloRnal Antibody
人急性单核细胞白血病单核细胞；AML-193形态特性: 淋巴母细胞生长特性: 悬浮生长Anti-IL17F Polyclonal Antibody
人结直肠癌肺转移细胞；T84形态特性: 上皮细胞生长特性: 贴壁生长Anti-Albumin Polyclonal Antibody
人结直肠腺癌细胞；NCI-H716[H716]形态特性: 上皮细胞生长特性: 贴壁生长Anti-PA2G4 Polyclonal Antibody
表达SV40T和EBNA1的人胚肾细胞；293ET大鼠Ⅱ(FⅡ)ELISA试剂盒DNP-AbELISAKit产品规格:48T/96T。
大鼠的牛血清白蛋白残留检测ELISA试剂盒DPDELISAKit产品规格:48T/96T。
大鼠α干扰素(IFN-α)ELISA试剂盒DPDELISAKit产品规格:48T/96T。
大鼠apelin12(AP12)ELISA试剂盒DPDELISAKit产品规格:48T/96T。
大鼠抗心磷脂抗体IgA(ACA-IgA)ELISA试剂盒DPDELISAKit产品规格:48T/96T。
大鼠抗心磷脂抗体IgM(ACA-IgM)ELISA试剂盒DPDELISAKit产品规格:48T/96T。
大鼠抗心磷脂抗体IgG(ACA-IgG)ELISA试剂盒DPPⅣELISAKit产品规格:48T/96T。
大鼠甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)ELISA试剂盒DPPⅣELISAKit产品规格:48T/96T。
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