细胞名称 犬蝠皮肤细胞;GSnFBS1
形态特性: 成纤维细胞样
生长特性: 贴壁生长
特征特性: 该细胞来源于一雄性犬蝠的皮肤组织。中国科学院昆明细胞库于2005年建立。
培养条件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)15%NBS
传代方法: 1:2传代;3-4天一次
传代情况: P2
冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测: 荧光法(-)
公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究,作为实验项目研究。下列产品详细介绍:
产品名称 | 生长特性 | 货号 |
犬蝠皮肤细胞;GSnFBS1 | 贴壁生长 | EY-X63725 |
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冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除细胞消化液。加入含血清的 *细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除细胞消化液后,加入含血清的*培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
Naringenin 7-O-β-D-glucuronide methyl ester
CAS No.:1985597-72-5
中文名:柚皮素-7-O-β-D-葡萄糖醛甲酯
分子式:C22H22O11
黄花败酱甙C;牡丹草苷B 订购|咨询 淀粉样蛋白β前体样蛋白1(APLP1) 规格: HPLC≥98%;5mg
基辛弗林 订购|咨询 淀粉样蛋白β前体样蛋白1(APLP1) 规格: HPLC≥98%;20mg
地榆皂苷II 订购|咨询 淀粉样蛋白β前体样蛋白2(APLP2) 规格: HPLC≥98%;20mg
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山栀苷酯 订购|咨询 淀粉样蛋白β前体蛋白结合蛋白B3(APBB3) 规格: HPLC≥98%;20mg
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维生素C 订购|咨询 弹性蛋白(ELN) 规格: 20mg
蝙蝠葛诺林(96%) 订购|咨询 弹性蛋白微原纤维界面因子1(EMILIN1) 规格: 10mg
ALR 肝再生增强因子抗体 现货供应 0.1ml Rosiglitazone HCL
Insulin Receptor R 胰岛素受体相关受体抗体 现货供应 0.2ml Solamargine
Islet 1 胰岛素基因增强结合蛋白1抗体 现货供应 0.2ml Solasonine
Lipin 1 脂酯酶LPIN1抗体 现货供应 0.2ml Angoroside C
APTNAP/ALPL 性酶抗体 现货供应 0.1ml Toremifene
PGC1 beta 过氧物酶体增殖物激活受体γ辅激活子1β抗体 现货供应 0.2ml Toremifene
PGC1 alpha + beta 过氧物酶体增殖物激活受体γ辅激活子1α+β抗体 现货供应 0.2ml Neratinib(HKI272)
SERPINA12/Vaspin 内脏脂肪组织源性丝蛋白酶抑制蛋白抗体 现货供应 0.2ml Methyl Protodioscin
苦参 进口、国产 英文名称:Ammothamnine 含量:BR,98%
铝G 进口、国产 英文名称:AluminumoxideG 含量:AR,98%
铝H 进口、国产 英文名称:AluminumoxideH 含量:USP级
酶 进口、国产 英文名称:XOD 含量:高层析纯,12ku/mg;液体
锰(Ⅳ) 进口、国产 英文名称:Manganesedioxide 含量:AR,98%
钼(VI) 进口、国产 英文名称:Molybdicanhydride 含量:CP,54%
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铽 进口、国产 英文名称:Tetraterbiumheptaoxide 含量:CP,97.5%
铜 进口、国产 英文名称:Cupricoxide 含量:AR,99%
钨 进口、国产 英文名称:Tungsten(VI)oxide 含量:4N,0.2㎜
犬蝠皮肤细胞;GSnFBS1葡萄糖天门冬素培养基规格:250g用途:葡萄糖天门冬素培养基
麦康凯琼脂3号规格:250g用途:用于肠道致病菌的选择性分离、培养
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酚红煌绿琼脂规格:250g用途:用于饲料中沙门氏菌分离培养
苦杏仁甙规格:20支详情介绍
L型细菌高渗盐增菌培养基规格:250g用途:用于L型细菌增菌培养