以下是军团菌属通用PCR试剂盒步骤的详细说明书:
产品名称 | 军团菌属通用PCR试剂盒步骤 |
英文名称 | Legionella spp. PCR |
编号 | EY00P751 |
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军团菌属通用PCR试剂盒步骤注意事项:
1.基础程序;
2.扩增温度和延伸温度;
3.反应时间;
4.循环次数;
5.PCR 反应液的配制;
6.PCR技术的基本原理;
7.PCR的反应动力学;
8.PCR扩增产物;
9.PCR反应体系与反应条件。
需要自备的器材:
1.军团菌属通用PCR试剂盒步骤仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:荧光 PCR 反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水
处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。
特点:
1.即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。
2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。
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麦康凯琼脂基础(SMAC)2550g用于致病性大肠杆菌(包括O7)的分离培养(SN/T0973-2000和SN/T2006)。
Peptone-E (Gelatin Peptone) 蛋白胨 E 100g incubation media Peptone-E (Gelatin Peptone) 蛋白胨 E 100g
谢瓦曲霉 支/瓶
DextroseAgar
ArginineBrothacc.ToSchubert
SCHAEDLER琼脂250g用于厌氧菌的分离培养
BETA-SSA琼脂 BETA-SSA Agar 用于链球菌的选择性分离培养
假单胞分离琼脂 Pseudomonas Isolation Agar 250 用于假单胞菌群的测定
葡萄糖蛋白胨培养基250g/瓶用于真菌和腐生菌的检验incubationmedia葡萄糖蛋白胨培养基250g/瓶用于真菌和腐生菌的检验
2216ELiquidMedium
NBB培养基250g用于啤酒中厌氧菌检测
乳酸杆菌肉汤培养基 Lactobacillus broth Medium 用于乳酸杆菌增菌培养
EYA培养基基础 Egg Yolk Agar Medium Base 250克 肉毒梭菌、产气荚膜梭菌的分离培养
碎肉培养基250g/瓶用于痤疮杆菌的培养,不含维生素K,需添加(庖肉牛肉粒)incubationmedia碎肉培养基250g/瓶用于痤疮杆菌的培养,不含维生素K,需添加(庖肉牛肉粒)
THBMedium
子宫成纤维细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
CGA Others Human 人 FSH alpha / TSH alpha / CGA 人细胞裂解液 (阳性对照)
叙利亚仓鼠皮肤细胞;GH-S1
人APP-PS1(M146L)双基因转染CHO细胞株;7WML6.0 癌细胞,MDA-MB-453细胞 GIK细胞,草鱼肾细胞系
人皮肤成纤维细胞;CCC-HSF-1
HA Others H9N2 甲型流感 H9N2 (A/Guinea fowl/Hong Kong/WF10/99) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照)
DCS 小鼠树突状细胞肉瘤细胞
成骨细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
人脉络丝表皮细胞 (HCPEpiC)( 5×105 )
人皮肤鳞癌细胞;A-431 [A431] 大鼠小肠粘膜上皮细胞*培养基 100mL
大鼠肝细胞瘤;H4-II-E-C3
EFNA2 Others Mouse 小鼠 EFNA2 / Ephrin-A2 人细胞裂解液 (阳性对照)
军团菌属通用PCR试剂盒步骤BIU-87 人浅表性膀胱癌细胞
BT474 人导管癌细胞
BxPC-3 人原位胰腺腺癌细胞
C26瘤 结肠癌
使用方法:
注:军团菌属通用PCR试剂盒步骤所有试剂使用前需*解冻,混合均匀,6,000rpm离心数秒后使用。
1. 样本处理(样本处理区)
待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等,具体提取方法请参照相关说明书;阳性质控品及阴性质控品无需提取,可直接使用。
2. 扩增试剂准备(PCR前准备区)
取N个(N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品)PCR反应管,每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量,两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。
组分每头份用量FMD RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。
1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s,转移至样本处理区。
2.加样(样本处理区)
3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl,盖紧管盖,于6,000rpm离心10s,转移至扩增区。