公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究,作为实验项目研究。下列产品详细介绍:
产品名称 | 生长特性 | 货号 |
小鼠肺成纤维细胞;WML2 | 贴壁生长 | EY-X63752 |
细胞名称 小鼠肺成纤维细胞;WML2
形态特性: 成纤维细胞样
生长特性: 贴壁生长
特征特性: 该细胞系来源于一雄性小鼠的肺组织。1985年中国科学院昆明细胞库建立。
培养条件: RPMI1640(w/oHepes)15%NBS
传代方法: 1:2传代;3-4天一次
传代情况: P6
冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测: 荧光法(-)
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冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
Tricin 7-O-glucoside
CAS No.:32769-01-0
中文名:苜蓿素-7-O-葡萄糖苷
分子式:C23H24O12
三七皂苷R1 订购|咨询 跨膜蛋白27(TMEM27) 规格: 20mg
圣草次苷 订购|咨询 跨膜蛋白27(TMEM27) 规格: 20mg
1羟基2,3,4,7四氧基山山 订购|咨询 跨膜蛋白27(TMEM27) 规格: 10mg
熊去氧胆 订购|咨询 跨膜蛋白2样蛋白(TMEM2L) 规格: 20mg
新芒果苷 订购|咨询 跨膜蛋白5(TMEM5) 规格: 20mg
邻氧基桂 订购|咨询 蜗管蛋白(COIL) 规格: 20mg
基莲心 订购|咨询 嗅素1(OLFM1) 规格: 20mg
荭草苷 订购|咨询 嗅素2(OLFM2) 规格: 20mg
厚朴 订购|咨询 嗅素3(OLFM3) 规格: 20mg
异佛手柑内酯 订购|咨询 嗅素4(OLFM4) 规格: 20mg
隐绿原 订购|咨询 嗅素4(OLFM4) 规格: 20mg
豆甾(95%) 订购|咨询 嗅素4(OLFM4) 规格: 20mg
香叶木素 订购|咨询 嗅蛋白(Olfactorin) 规格: 20mg
华基(97%) 订购|咨询 锚定蛋白重复域蛋白1(ANKRD1) 规格: 20mg
长春瑞滨 订购|咨询 锚定蛋白重复域蛋白1(ANKRD1) 规格: 20mg
苍术素 订购|咨询 锚定蛋白重复域蛋白1(ANKRD1) 规格: 20mg
白花前胡素 订购|咨询 锡蛋白(SNN) 规格: 20mg
补骨脂二氢黄 订购|咨询 催产素(OT) 规格: 20mg
WAPL EBV核蛋白2抗体 现货供应 0.2ml Sodium phosphate, dibasic, heptahydrate
CAPD3/hCAPD3 浓缩素2复合亚基D3抗体 现货供应 0.2ml dATP 100 mM solution
AMSH 信号转导衔接结合蛋白抗体 现货供应 0.2ml Sodium decanoate
ASB3 锚蛋白重复序列细胞因子信号抑制物盒蛋白家族3抗体 现货供应 0.2ml Agarose
EIF2C1/Ago1 真核翻译起始因子2C1抗体 现货供应 0.2ml Agarose
Anillin 胞环蛋白肌动蛋白结合蛋白抗体 现货供应 0.2ml Phytohemagglutinin
BIN3 细胞骨架衔接蛋白BIN3抗体 现货供应 0.2ml Kinetin,6Furfurylaminopurine
CCDC11 卷曲螺旋结构域蛋白11抗体 现货供应 0.2ml EGTA, egtazic acid
红相关物质N标准品 规格:50mg 英文名称:
吡嗪酰标准品 规格:200mg 英文名称:Pyrazinamide
()表没食子儿茶素没食子酯标准品 规格:20mg 英文名称:
烟酰标准品 规格:500mg 英文名称:Niacinamide (Vitamin B3)
异标准品 规格:1.2ml×3ampules 英文名称:Cumene
曲三硅相关物质B标准品 规格:25mg 英文名称:
醋标准品 规格:500mg 英文名称:Betamethasone Acetate
阿散标准品 规格:25mg 英文名称:Arsanilic Acid
琥珀美尔标准品 规格:200mg 英文名称:Metoprolol Succinate
非那雄标准品 规格:200mg 英文名称:Finasteride
小鼠肺成纤维细胞;WML2棉子糖-双岐杆菌鉴定规格:20支详情介绍
牛津琼脂(OXA)平板(9cm)规格:10个/包用途:用于单增李氏菌的选择性分离
无氮培养基规格:250g用途:用于自生固氮菌和钾细菌的培养
辅酶I(NDA)规格:1g用途:进口
匹克氏肉汤基础A规格:100g用途:用于溶血性链球菌的增菌培养 ,需添加脱纤维羊血(GB标准)
SIM动力培养基规格:250g用途:用于动力试验
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除细胞消化液。加入含血清的 *细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除细胞消化液后,加入含血清的*培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。