人疱疹病毒通用PCR试剂盒步骤注意事项:
1.基础程序;
2.扩增温度和延伸温度;
3.反应时间;
4.循环次数;
5.PCR 反应液的配制;
6.PCR技术的基本原理;
7.PCR的反应动力学;
8.PCR扩增产物;
9.PCR反应体系与反应条件。
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以下是人疱疹病毒通用PCR试剂盒步骤的详细说明书:
产品名称 | 人疱疹病毒通用PCR试剂盒步骤 |
英文名称 | Human Herpesvirus RTPCR |
编号 | EY00P644 |
使用方法:
注:人疱疹病毒通用PCR试剂盒步骤所有试剂使用前需*解冻,混合均匀,6,000rpm离心数秒后使用。
1. 样本处理(样本处理区)
待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等,具体提取方法请参照相关说明书;阳性质控品及阴性质控品无需提取,可直接使用。
2. 扩增试剂准备(PCR前准备区)
取N个(N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品)PCR反应管,每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量,两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。
组分每头份用量FMD RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。
1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s,转移至样本处理区。
2.加样(样本处理区)
3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl,盖紧管盖,于6,000rpm离心10s,转移至扩增区。
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Raji,人Butt's淋巴瘤细胞
HAN 人羊膜细胞
CSF1 Others Human 人 / 食蟹猴 M-CSF / CSF-1 人细胞裂解液 (阳性对照)
CM-R107大鼠海马神经元细胞*培养基100mL
小鼠间充质干细胞-骨髓MMSC-bm
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0919 人成骨细胞*培养基 100mL
CL-0048Ca Ski(人上皮细胞)5×106cells/瓶×2
BTLA Others Cynomolgus 食蟹猴 BTLA 人细胞裂解液 (阳性对照)
溶液 200 mML-Gue
SNU-398细胞,人肝癌细胞 人类胚胎肾脏表皮细胞,H293T细胞 视网膜色素上皮细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
大耳山羊肾细胞;LDG-2
SFRP1 Others Human 人 sFRP1 / SARP2 人细胞裂解液 (阳性对照)
Raji,人Butt's淋巴瘤细胞
HAN 人羊膜细胞
CSF1 Others Human 人 / 食蟹猴 M-CSF / CSF-1 人细胞裂解液 (阳性对照)
CM-R107大鼠海马神经元细胞*培养基100mL
小鼠间充质干细胞-骨髓MMSC-bm
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0919 人成骨细胞*培养基 100mL
厌氧培养液250g用于厌氧菌增菌培养
10%化胰酪胨大豆肉汤 10% NaCl Tryptic Soy Broth 用于金黄色葡萄球菌的MPN测定,增菌培养(GB2008标准)
牛肉浸粉 Beef Extract Powder 250 培养基原材料,提供细菌生长所需的生长因子
强化梭菌琼脂250g/瓶用于梭菌的分离培养incubationmedia强化梭菌琼脂250g/瓶用于梭菌的分离培养
甲基红指示剂盒 5ml*2 用于甲基红试验
3%氯三糖铁琼脂2550g用于副溶血性弧菌的生化反应。(GB、SN)
4121-prf EpiCM-2-prf 上皮细胞培养基-2 500 ml incubation media 4121-prf EpiCM-2-prf 上皮细胞培养基-2 500 ml
Trypticase(Tryptic)SoyBroth
6.5%NaClDextroseAgar
TM培养基 250g 用于淋球菌的分离培养(Quelab方法)
人疱疹病毒通用PCR试剂盒步骤EC-MUGMedium
亚盐还原厌氧菌孢子液体培养基 用于亚盐还原厌氧菌孢子的增菌培养。
YM肉汤 YM Broth 250克 BR
哥伦比亚MUG培养基250用于大肠杆菌的荧光检测(SN标准)incubationmedia哥伦比亚MUG培养基250用于大肠杆菌的荧光检测(SN标准)
Nutrientagarslant
需要自备的器材:
1.人疱疹病毒通用PCR试剂盒步骤仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:荧光 PCR 反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水
处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。
特点:
1.即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。
2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。