实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究,作为实验项目研究。下列产品详细介绍:
产品名称 | 生长特性 | 货号 |
肝癌细胞;CSQT-1 | 贴壁生长 | EY-X63949 |
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细胞名称 肝癌细胞;CSQT-1
形态特性: 上皮细胞样
生长特性: 贴壁生长
特征特性: 该细胞属保藏,其特征特性尚未公开。
培养条件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS
传代方法: 1:3传代,3-4天传1次
传代情况: C2
冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测: 阴性
冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除细胞消化液。加入含血清的 *细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除细胞消化液后,加入含血清的*培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
生育酚转运蛋白检测试剂盒细胞名称: 杂交瘤细胞株;NGAL-4F6形态特性: 淋巴母细胞样tocopherol
二氢黄醇4-还原酶检测试剂盒细胞名称: 杂交瘤细胞株;NGAL-3B5形态特性: 淋巴母细胞样DFR
烟草脆裂病检测试剂盒细胞名称: 杂交瘤细胞株;1A4形态特性: 淋巴母细胞样Tobacco rattle virus
6-磷葡萄糖检测试剂盒细胞名称: 杂交瘤细胞株;3B5形态特性: 淋巴母细胞样6- glucose phosphate
6-磷果糖检测试剂盒细胞名称: 杂交瘤细胞株;NGAL-2D8形态特性: 淋巴母细胞样6- fructose phosphate
环斑病检测试剂盒细胞名称: 胚肾细胞;HEK293-MAN1A1&A2&B1-TKO形态特性: 上皮样Tobacco ringspot virus
南方菜豆花叶病检测试剂盒细胞名称: 杂交瘤细胞株;CRP2形态特性: 淋巴母细胞样Southernbeanmosaicsobemovirus
南芥菜花叶病检测试剂盒细胞名称: 杂交瘤细胞株;6F20形态特性: 淋巴母细胞样Arabis mosaic nepo virous
酪蛋白激酶3检测试剂盒细胞名称: 杂交瘤细胞株;1F38形态特性: 淋巴母细胞样casein kinase3
组蛋白H3.2检测试剂盒细胞名称: 杂交瘤细胞株;TS-IFNγ-13形态特性: 淋巴母细胞样Histone H3.2
tubby蛋白检测试剂盒细胞名称: 小鼠正常肾上皮细胞;MNREC/HL-044MurineNormalRenalEpithelialCells,MNREC/HL-044形态特性: 淋巴母细胞样tubby protein
组蛋白H2A检测试剂盒细胞名称: 杂交瘤细胞株;TS-CD4-38形态特性: 淋巴母细胞样Histone H2A
磷脂酰甘油检测试剂盒细胞名称: 小鼠正常胸腺上皮细胞;MNTEC/HL-045MurineNormalThymicEpithelialCells,MNTEC/HL-045形态特性: 淋巴母细胞样phosphatidyl glycerol
黄瓜花叶病检测试剂盒细胞名称: 小鼠正常附睾上皮细胞;MNEEC/HL-046MurineNormalEpididymalEpithelialCells,MNEEC/HL-046形态特性: 淋巴母细胞样Cucumber mosaic virus
ω-脂肪去饱和酶检测试剂盒细胞名称正常结膜上皮细胞;HNCEC/HL-043HumanNormalConjunctivalEpithelialCells,HNCEC/HL-043形态特性: 上皮样ω-fatty acid desaturases
ω-3脂肪去饱和正常口腔黏膜上皮细胞;HNOEC/HL-047HumanNormalOralEpithelialCells,HNOEC/HL-047形态特性: 上皮样ω-3fatty acid desaturases
单磷尿苷检测试剂盒细胞名称: 杂交瘤细胞株;1C3A形态特性: 淋巴母细胞样Uridine monophosphate
肝癌细胞;CSQT-150-55-5英文名:Yohimban-16-carboxylic acid
英文别名:3,20-Yohimban-16-carboxylic acid
CAS登录号:50-55-5
分子式:C33H40N2O9
分子量:608.27
分子结构:
外观:白色或浅黄褐色结晶性粉末
规格:20mg/支
纯度:≥ 98%
用途:用于含量测定/鉴定/药理实验等。
提取来源:萝芙木属多种植物
溶解性:易溶于二、,能溶于、,稍溶于、、乙醇、、乙和柠檬的稀水溶液,难溶于水
熔点:264~265℃(分解)
旋光度:–123±3°(c﹦1%,chloroform)-117.7°(), -164°()或-168°(二甲基甲酰胺)
药理药效:是能神经元阻断性抗高血压药。本品通过耗竭周围交感神经末梢的,心、脑及其他组织中的儿茶酚胺和 5-羟色胺达到抗高血压、减慢心率和抑制中枢神经系统的作用。作用于下丘脑部位产生镇静作用,但无致嗜睡和麻醉作用,不改变睡眠时脑电图,可缓解高血压病人焦虑、紧张和头痛。实验动物给予低于临床剂量的后,即出现瞳孔缩小、眼睑松弛和下垂、体温过低、胃肠道活动加快等症状。
贮存条件: 4℃冷藏、密封、避光
有效期: 2年