细胞名称 恒河猴肺细胞;RM-L1
形态特性: 成纤维细胞样
生长特性: 贴壁生长
特征特性: 该细胞系来源于一雄性猕猴的肺组织。1985年中国科学院昆明细胞库建立。
培养条件: McCoy's5AMedia(ModifiedwithTricine)15%NBS
传代方法: 1:2传代;3-4天一次
传代情况: P4
冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测: 荧光法(-)
公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究,作为实验项目研究。下列产品详细介绍:
产品名称 | 生长特性 | 货号 |
恒河猴肺细胞;RM-L1 | 贴壁生长 | EY-X63745 |
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冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大??;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除细胞消化液。加入含血清的 *细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除细胞消化液后,加入含血清的*培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
Quercetin 4'-O-galactoside
CAS No.:381728-34-3
中文名:槲皮素-4'-O-半乳糖苷
分子式:C21H20O12
(±)原苏木素B 订购|咨询 普列克底物蛋白(PLEK) 规格: 20mg
柴胡皂苷a 订购|咨询 普列克底物蛋白2(PLEK2) 规格: 20mg
醋 订购|咨询 普列克底物蛋白同源物样域家族A成员2(PHLDA2) 规格: 50mg
绞股蓝 订购|咨询 粪卟啉原氧酶(CPOX) 规格: 2g
儿茶 订购|咨询 湿结合蛋白(RTBDN) 规格: 0.5g
石见穿 订购|咨询 滑行蛋白α(TXLNα) 规格: 10g
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对羟基酯 订购|咨询 滑行蛋白γ(TXLNγ) 规格: 100mg
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环维黄杨星D 订购|咨询 游离状腺素(fT4) 规格: 20mg
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伐昔洛韦 订购|咨询 滋养层特异性糖蛋白(TPBG) 规格: 100mg
异槲皮苷 订购|咨询 富酪蛋白(STATH) 规格: 20mg
石杉 订购|咨询 窖蛋白(CAV1) 规格: 50mg
赛门苷I 订购|咨询 窖蛋白(CAV1) 规格: HPLC≥98%,20mg/支;
老鹳草素 订购|咨询 窖蛋白(CAV1) 规格: HPLC≥98%,20mg/支
欧夹竹桃苷 订购|咨询 窖蛋白(CAV1) 规格: HPLC≥98%;5mg/支
川楝素 订购|咨询 窖蛋白(CAV1) 规格: HPLC≥98%,20mg/支
ALS2CR8 肌侧索硬2染色体区域候选蛋白8抗体 现货供应 0.2ml Tirapazamine(SR259075; Win59075; SR4233)
Corin 心脏特异性丝蛋白酶抗体 现货供应 0.2ml Dextrin
GPR55 蛋白偶联受体55抗体 现货供应 0.2ml Benzidamine HCl
LAP3 亮基肽酶3抗体 现货供应 0.2ml Sephadex G50
LMW Kininogen/Kininogen 1 低分子量生长促进因子抗体(激肽原1) 现货供应 0.2ml Sephadex G50
KMB1/Maxi Potassium channel beta 钙激活通道蛋白β1抗体 现货供应 0.2ml (S)(+)Mandelic acid
P2RX4 三腺苷门控阳离子通道蛋白抗体 现货供应 0.2ml (R)(−)Mandelic acid
ATP6IP2 ATP酶H+转运溶酶体辅助蛋白2抗体 现货供应 0.2ml 1Aminohydantoin Hydrochloride
正辛基谷 进口、国产 英文名称:OGP 含量:精制级,150000000u/g
正辛 进口、国产 英文名称:SodiumCaprylate 含量:AR,90%
正已 进口、国产 英文名称:Hexanoicacid 含量:BR,85%
芝加哥天蓝6B 进口、国产 英文名称:Chicagoskyblue6B 含量:BS,85%
脂多糖 进口、国产 英文名称:LPS 含量:高纯,98%
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脂蜡 进口、国产 英文名称:StearicAcid 含量:CP,98.5%
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脂质体2000 进口、国产 英文名称:Lipofectamine2000TransfectionReagent 含量:AR,99%
恒河猴肺细胞;RM-L1肉汤基础规格:250g用途:用于蜡样芽孢杆菌的试验
李斯特氏菌显色培养基规格:1000ml用途:用于李斯特氏菌的显色培养,单增李斯特氏菌显蓝色,外围有一不透明环
孟加拉红培养基规格:250g用途:用于食品中霉菌及酵母菌总数测定
精氨肉汤规格:250g用途:用于游泳池中假单胞菌检测
胰酪胨大豆多粘菌素肉汤基?。?/font>GB)规格:(2.25万单位)用途:2.25万单位
纤维二糖-(CC)琼脂规格:250g用途:用于弧菌的分离培养