细胞名称 小耳猪肺细胞；SEP-L1
形态特性: 成纤维细胞样
生长特性: 贴壁生长
特征特性: 该细胞系来源于一雌性小耳猪的皮肤组织。1988年由中国科学院昆明细胞库建立。
培养条件: M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS
传代方法: 1：2传代；3-4天一次
传代情况: P2
冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测: 荧光法（-）
公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究，作为实验项目研究。下列产品详细介绍：
产品名称 | 生长特性 | 货号 |
小耳猪肺细胞；SEP-L1 | 贴壁生长 | EY-X63760 |
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冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将成1mm3左右大?。?/span>
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除细胞消化液。加入含血清的 *细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除细胞消化液后，加入含血清的*培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
1,3-二磷甘油检测试剂盒细胞名称: 大鼠垂体瘤细胞；GH3形态特性: 上皮样1,3-Disphosphoglycerate
1,5-脱水葡萄糖醇;1,5-脱水山梨检测试剂盒细胞名称: 小鼠胚胎成纤维细胞；3T3-Swissalbino形态特性: 成纤维细胞样1,5-Anhydroglucitol
11去氢血栓B2检测试剂盒细胞名称: 二氢叶还原酶缺陷型中国仓鼠卵巢细胞；CHO/dhFr-形态特性: 上皮样11-dehydro-thromboxane B2
11脱氢血栓素B2检测试剂盒细胞名称: 小鼠垂体瘤细胞；GT1-1形态特性: 上皮样11-dehydro-thromboxane B2
17-皮质类固醇检测试剂盒细胞名称: 人前列腺癌细胞；DU145[DU145；DU-145]形态特性: 上皮样l7-ketosteroid
2-硫代噻唑-4-羧检测试剂盒细胞名称: 人胚肾细胞；293[HEK-293]形态特性: 上皮样2-thiothiazolidine-4-carboxylic acid
3型1-磷鞘氨醇受体检测试剂盒细胞名称: 人肺癌细胞；A549[A-549]形态特性: 上皮样；多角形sphingosine 1-phosphate receptor type 3
5-羟色胺转运体蛋白检测试剂盒细胞名称: 小鼠胚胎成骨细胞前体细胞；MC3T3-E1形态特性: 成纤维细胞样Serotonin Transporter
6丙酰四氢蝶呤合酶检测试剂盒细胞名称: 人癌细胞；MCF7形态特性: 上皮样 6-pyruvoyl tetrahydrobiopterin synthase
70kDa热休克蛋白5检测试剂盒细胞名称: 人细胞；HeLa形态特性: 上皮样Heat Shock 70 KDa Protein 5
Ⅸ型胶原蛋白检测试剂盒细胞名称: 人癌细胞；MDA-MB-453形态特性: 上皮样；多角形Collagen Type Ⅸ
adropin检测试剂盒细胞名称: 小鼠神经母细胞瘤细胞与大鼠胶质瘤细胞之融合细胞；NG108-15[108CC15]形态特性: 扁平；圆形；直径10～100mmadropin
AP2A2检测试剂盒细胞名称: 小鼠畸胎瘤细胞；P19形态特性: 上皮样Adaptor-Related Protein Complex 2, alpha 2 Subunit
Argonaut-2蛋白检测试剂盒细胞名称: 人恶性多发性畸胎瘤细胞；NTERA-2形态特性: 上皮样Argonaut2
ATP依赖的RNA解旋酶A检测试剂盒细胞名称: 人卵巢畸胎瘤细胞；PA-1形态特性: 上皮样DHX9
B7-1检测试剂盒细胞名称: 小鼠胚胎成纤维细胞；NIH/3T3形态特性: 成纤维细胞样B7-1
B7同系物6检测试剂盒细胞名称: 人胰腺癌细胞；PANC-1形态特性: 上皮样；多角形B7-H6
小耳猪肺细胞；SEP-L1Stuart运送培养基规格：250g用途：用于致病菌标本的运送保存
K氏培养基规格：250g用途：用于果汁或浓缩果汁中脂环芽孢杆菌和其他耐热耐菌检测（滤膜法）
胆盐七叶苷琼脂规格：250g用途：用于肠球菌和肠道致病菌的分离培养
快速硫化氢试验琼脂规格：250g用途：用于弯曲杆菌的硫化氢试验（GB标准）
Bolton肉汤规格：Bolton肉汤添加剂详情介绍
麦芽汁培养基规格：250g用途：用于霉菌和酵母菌增菌培养
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