公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究,作为实验项目研究。下列产品详细介绍:
产品名称 | 生长特性 | 货号 |
胚胎气管组织来源细胞;CCC-HBE-2 | 贴壁生长 | EY-X63350 |
细胞名称 胚胎气管组织来源细胞;CCC-HBE-2
形态特性:
生长特性: 贴壁生长
特征特性: 取材自引产的11周男性胚胎组织,该细胞由中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心建立。
培养条件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)20%FBS
传代方法: 1:3传代;3~4天1次。
传代情况: P4
冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测: 培养法(-)
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冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
小鼠杂交瘤细胞株;5E4G5形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 悬浮生长Anti-FCGR2B Polyclonal Antibody
叙利亚仓鼠肾细胞系;BHK-21CIAPIN1+形态特性: 上皮样生长特性: 贴壁生长Anti-MSH4 Polyclonal Antibody
小鼠杂交瘤细胞株;LB_001形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 悬浮生长Anti-MCP-3 Polyclonal Antibody
小鼠杂交瘤细胞株;JF-IgD形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 悬浮生长Anti-GPHN Polyclonal Antibody
小鼠杂交瘤细胞株;5D2F2形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 悬浮生长Anti-PSMD14 Polyclonal Antibody
小鼠杂交瘤细胞株;WSSV-K1形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 悬浮生长Anti-E2F6 Polyclonal Antibody
小鼠杂交瘤细胞株;WSSV-K2形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 悬浮生长Anti-RASGRP3 Polyclonal Antibody
小鼠杂交瘤细胞株;Ss-IgM形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 悬浮生长Anti-SN1G Polyclonal Antibody
胃癌耐药细胞株;BGC823/形态特性: 上皮样生长特性: 贴壁生长Anti-C7 Polyclonal Antibody
小鼠杂交瘤细胞株;MCM1形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 悬浮生长Anti-DENND1B Polyclonal Antibody
肝癌细胞株;LM3形态特性: 上皮样生长特性: 贴壁生长Anti-Integrin alpha 3 Polyclonal Antibody
小鼠杂交瘤细胞株;LCZ4H3形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 悬浮生长Anti-CRYAA Polyclonal Antibody
小鼠杂交瘤细胞株;Sm-IgM形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 悬浮生长Anti-FIP1L1 Polyclonal Antibody
小鼠杂交瘤细胞株;LCZ2A6形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 悬浮生长Anti-PRDX1 Polyclonal Antibody
小鼠杂交瘤细胞株;7G4.3形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 悬浮生长Anti-ME1 Polyclonal Antibody
小鼠杂交瘤细胞株;11-1形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 悬浮生长Anti-EMC10 Polyclonal Antibody
胚胎气管组织来源细胞;CCC-HBE-2大鼠白介素15(IL-15)ELISA试剂盒GAP-43ELISAKit产品规格:48T/96T。
大鼠白介素13(IL-13)ELISA试剂盒GAPELISAKit产品规格:48T/96T。
大鼠结缔组织生长因子(CTGF)ELISA试剂盒GastrointestinalcancerMarker-CA199ELISAKit产品规格:48T/96T。
大鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA试剂盒GBMELISAKit产品规格:48T/96T。
大鼠组织因子(TF)ELISA试剂盒GCAELISAKit产品规格:48T/96T。
大鼠C反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒GCELISAKit产品规格:48T/96T。
大鼠Ⅲ型胶原(ColⅢ)ELISA试剂盒GCKELISAKit产品规格:48T/96T。
大鼠Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢNT)ELISA试剂盒GCP-2ELISAKit产品规格:48T/96T。
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除细胞消化液。加入含血清的 *细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除细胞消化液后,加入含血清的*培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。