实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究,作为实验项目研究。下列产品详细介绍:
产品名称 | 生长特性 | 货号 |
肺癌细胞;907 | 贴壁生长 | EY-X63986 |
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细胞名称 肺癌细胞;907
形态特性: 上皮细胞样
生长特性: 贴壁生长
特征特性: 该细胞属保藏,其特征特性尚未公开。
培养条件: McCoy's5AMedia(ModifiedwithTricine)10%FBS
传代方法: 1:3~1:8传代;每周2~8次。
传代情况: C5
冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测: 阴性
冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除细胞消化液。加入含血清的 *细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除细胞消化液后,加入含血清的*培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
角化细胞内分泌因子检测试剂盒生长特性: 半贴壁生长培养条件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSkeratinocyte autocrine factor;Amphiregulin
静止素Q6硫基氧化酶1检测试剂盒生长特性: 半贴壁生长培养条件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSSulfhydryl oxidase 1
静止素Q6硫基氧化酶2检测试剂盒生长特性: 贴壁生长培养条件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)新生牛血清,10%Sulfhydryl oxidase 2
巨噬细胞炎性蛋白3β检测试剂盒生长特性: 贴壁生长培养条件: DMEM/F12(1:1):Ham'sF12/DMEMedium(DMEH-16/F-1250%Mixturew/oHEPES,withNEAAMedium)新生牛血清,10%Macrophage Inflammatory Protein 3β
巨噬细胞炎症蛋白1β检测试剂盒生长特性: 贴壁生长培养条件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)新生牛血清,10%macrophage inflammatory protein 1β
抗IgE受体抗体检测试剂盒生长特性: 贴壁生长培养条件: F12K新生牛血清,10%IgE receptor-Ab
抗L型钙通道蛋白抗体检测试剂盒生长特性: 贴壁生长培养条件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)新生牛血清,10%;水解乳蛋白,10%Anti-CAA1C;Anti-CACH2;CaV1.2
抗N-甲基-D-天冬氨受体抗体检测试剂盒生长特性: 贴壁生长培养条件: F12K新生牛血清,10%N-methyl- D-aspartate receptor antibody
抗甲状腺微粒体抗体检测试剂盒生长特性: 悬浮生长培养条件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)新生牛血清,10%Anti-Thyroid Microsome Antibody
抗透明带抗体检测试剂盒生长特性: 贴壁生长培养条件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)新生牛血清,10%anti-zona pellucida antibody
抗小核糖核蛋白;Sm抗体检测试剂盒生长特性: 半贴壁生长培养条件: RPMI1640(w/oHepes)新生牛血清,10%small nuclear ribonucleoprotein
抗心磷脂IgA抗体检测试剂盒生长特性: 半贴壁生长培养条件: RPMI1640(w/oHepes)新生牛血清,10%anti-cardiolipin antibody IgA
抗心磷脂IgM抗体检测试剂盒生长特性: 半贴壁生长培养条件: RPMI1640(w/oHepes)新生牛血清,10%anti-cardiolipin antibody IgM
抗血小板IgG抗体检测试剂盒生长特性: 半贴壁生长培养条件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)新生牛血清,10%platelet antibodies IgG
抗中性粒细胞抗体检测试剂盒生长特性: 半贴壁生长培养条件: RPMI1640(w/oHepes)新生牛血清,10%anti-neutrophil antibody
可溶性CD44V6检测试剂盒生长特性: 半贴壁生长培养条件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)新生牛血清,10%sCD44v6
可溶性CD86检测试剂盒生长特性: 半贴壁生长培养条件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)新生牛血清,10%sCD86
肺癌细胞;907异土木香内酯470-17-7中文别名:异阿兰内酯
英文名:Isoalantolactone
CAS登录号:470-17-7
分子式:C15H20O2
分子量:232.31
分子结构:
外观:无色针晶()
规格:20mg/支
纯度:≥ 98%
用途:用于含量测定/鉴定/药理实验等。
提取来源:菊科植物土木香 Inula helenium L.根,藏木香I.Racemosa Hook.F.等。
溶解性:溶于乙醇、、和,不溶于水。
熔点:112-113℃
药理药效:1.驱虫作用异土木香内酯的药理作用与山道年相似,以驱虫作用为主。对猪和猫的蛔虫异土木香内酯和土木香内酯的混合物对Australorbis glabratus有很强的性和灭杀作用。有强的抗原虫作用,体外0.24~7.8ug/ml 对痢疾阿米巴和******************毛滴虫有效。 2.抗菌作用体外抗皮肤真菌试验,对须癣毛菌、大小孢菌有明显的抑制作用,作用强度与制菌霉素相当,而逊于;低抑制浓度,对表皮癣菌为35ug./ml,对须发癣菌为25ug/ml,对尖发癣菌为15ug/ml;对豚鼠感染须发癣菌的体内试验,1.5%异土木香内酯油膏有很好的治疗作用。还有很强的抗结核杆菌和其他微生物的作用。 3.其他作用异土木香内酯与土木香内酯的混合物,家兔注射0.1g/kg以上,明显降低尿中硫盐的量,而对氮排泄没有影响。 [性]小鼠皮下注射小致死量为200mg/kg,性比山道年小。
贮存条件: 4℃冷藏、密封、避光
有效期: 2年