细胞名称 赤狐肺成纤维样细胞;RF-88L
形态特性: 成纤维细胞样
生长特性: 贴壁生长
特征特性: 该细胞系来源于一雌性赤狐的肺组织。1988年由中国科学院昆明细胞库建立。赤狐具有B染色体。
培养条件: M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS
传代方法: 1:2传代;3-4天一次
传代情况: P3
冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测: 荧光法(-)?
产品名称 | 赤狐肺成纤维样细胞;RF-88L |
生长特性 | 贴壁生长 |
货号 | EY-X63782 |
产品特点:
1、 使用方便:不需昂贵设备。
2、 可以处理各种细菌菌体,包括新鲜菌液和冰冻菌体。
3、 将蛋白提取的时间缩短至30分钟-1小时。
4、 采用温和的中性裂解组分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。
6、 紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。
7、 蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂;每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本试剂盒中不有EDTA,与金属螯和层析等兼容。
培养操作步骤 :
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
操作流程:
1.1主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生的细胞,以0.25%消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生的细胞用消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分产品现货,超低比价,产品名称货期短,价格优,售后齐全。
趋化因子配体17检测试剂盒细胞名称: 非洲绿猴肾细胞;VERO-76形态特性: 上皮样细胞CXC-chemokine ligand 17
醛脱氢酶1家族成员A1检测试剂盒细胞名称: 人肺癌细胞;A549[A-549]形态特性: 上皮样;多角形Retinal dehydrogenase 1
热休克70kDa蛋白12B检测试剂盒细胞名称: 人胚肺二倍体细胞;KMB-17形态特性: 成纤维细胞样Heat Shock 70kDa Protein 12B
热休克蛋白10检测试剂盒细胞名称: 人细胞;HelaS3[HeLaS3]形态特性: 上皮样Heat Shock Protein 10
热休克蛋白72检测试剂盒细胞名称: 小鼠骨髓瘤细胞;Sp2/0-Ag14形态特性: 淋巴母细胞样;圆形Heat Shock Protein 72
人磷化的H2AX抗体检测试剂盒细胞名称: 非洲绿猴肾细胞;VERO形态特性: 上皮样细胞S139
特异性β1糖蛋白检测试剂盒细胞名称: 抗丙型肝炎病核心抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株;HCV-C39形态特性: 淋巴母细胞样Pregnancy Specific β1 Glycoprotein
溶酶体相关膜蛋白2检测试剂盒细胞名称: 抗乙型肝炎病表面抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株;HBS-r6形态特性: 淋巴母细胞样lysosomal-associated membrane protein 2
溶血补体检测试剂盒细胞名称: 抗丙型肝炎病NS3抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株;HCVNS3-57形态特性: 淋巴母细胞样Hemolytic complement
乳清磷核糖转移酶检测试剂盒细胞名称: 抗丙型肝炎病NS5抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株;NS5形态特性: 淋巴母细胞样orotatephos phoribosyltransferase
状瘤病抗体检测试剂盒细胞名称: 抗丙型肝炎病膜区抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株;HCVEA-246形态特性: 淋巴母细胞样HPV Antibody
珠蛋白检测试剂盒细胞名称: 抗呼吸道合胞病单克隆抗体杂交瘤细胞株;RSV-4C1形态特性: 淋巴母细胞样mammaglobin
*氧苄氨嘧啶检测试剂盒细胞名称: 抗戍型肝炎病单克隆抗体杂交瘤细胞株;HEV-4形态特性: 淋巴母细胞样Trimethoprim
杀伤细胞免疫球蛋白样受体检测试剂盒细胞名称: 小鼠胚胎细胞;SC-1形态特性: 成纤维细胞样killer cell immunoglobin-like receptor
沙眼衣原体主要外膜蛋白检测试剂盒细胞名称: 小鼠结缔组织L细胞株929克隆;L-929[L929]形态特性: 成纤维细胞样CTMOMP
上皮膜蛋白2检测试剂盒细胞名称: 非洲绿猴肾细胞;CV-1形态特性: 成纤维细胞样Epithelial membrane protein 2
上皮膜抗原检测试剂盒细胞名称: 人非小细胞肺癌细胞;H125形态特性: 上皮样细胞epithelial membrane antigen
赤狐肺成纤维样细胞;RF-88LKEA琼脂(不含糖)规格:250g用途:用于食品、水和其它物质中肠球菌的分离培养和计数
美蓝(亚甲基蓝)规格:25g用途:炭疽杆菌检测用配套试剂
双歧杆菌BS培养基(不含琼脂)规格:250g用途:用于双歧杆菌增菌培养
七叶苷(进口)规格:10g用途:微生物指示剂
水杨素(进口)规格:10g用途:微生物指示剂
副结核阳性血清规格:4ml用途:检验