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产品名称 | 源胰腺癌细胞;PAXC-010 |
生长特性 | 贴壁生长 |
货号 | EY-X63999 |
细胞名称 源胰腺癌细胞;PAXC-010
形态特性: 上皮细胞样
生长特性: 贴壁生长
特征特性: 该细胞属保藏,其特征特性尚未公开。
培养条件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS
传代方法: 1:3传代,3-4天传1次
传代情况: C2
冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测: 阴性
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产品特点:
1、 使用方便:不需昂贵设备。
2、 可以处理各种细菌菌体,包括新鲜菌液和冰冻菌体。
3、 将蛋白提取的时间缩短至30分钟-1小时。
4、 采用温和的中性裂解组分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。
6、 紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。
7、 蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂;每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本试剂盒中不有EDTA,与金属螯和层析等兼容。
培养操作步骤 :
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
操作流程:
1.1主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生的细胞,以0.25%消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生的细胞用消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。
未饱和铁结合力检测试剂盒生长特性: 贴壁生长培养条件: RPMI1640(w/oHepes)胎牛血清,10%unsaturated iron binding capacity
丁钠酶检测试剂盒生长特性: 贴壁生长培养条件: RPMI1640(w/oHepes)胎牛血清,20%Sodium butyrate
趋化因子配体11检测试剂盒生长特性: 贴壁生长培养条件: RPMI1640(w/oHepes)胎牛血清,10%CCL11
血管内皮生长因子抗体检测试剂盒生长特性: 贴壁生长培养条件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)优质胎牛血清,10%Vascular Endothelial cell Growth Factor antibody
血浆蛋白检测试剂盒生长特性: 悬浮生长培养条件: IMDM:Iscove'sModiefiedDulbecco'sMedium优质胎牛血清,10%Plasma protein
补体受体1检测试剂盒生长特性: 悬浮生长培养条件: IMDM:Iscove'sModiefiedDulbecco'sMedium胎牛血清,20%complement receptor 1
β-伴大豆球蛋白检测试剂盒生长特性: 贴壁生长培养条件: RPMI1640(w/oHepes)优质胎牛血清,10%β-conglycinin
抗猪圆环病抗体检测试剂盒生长特性: 贴壁生长培养条件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)优质胎牛血清,10%Porcine circovirus antibody
多胺氧化酶检测试剂盒生长特性: 贴壁生长培养条件: RPMI1640(w/oHepes)胎牛血清,10%PolyamineAmine oxidase
核苷结合寡聚化结构域样受体蛋白1检测试剂盒生长特性: 贴壁生长培养条件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBSnucleotide-binding oligomerization domain
跨膜受体蛋白Notch-1检测试剂盒生长特性: 半贴壁生长培养条件: L15:LeibovitzMedium胎牛血清,10%Neurogenic locus notch homolog protein 1
3-磷肌醇依赖性蛋白激酶-1检测试剂盒生长特性: 贴壁生长培养条件: RPMI1640(w/oHepes)胎牛血清,10%3-phosphoinositide-dependent protein kinase-1
磷化丙脱氢酶激酶1检测试剂盒生长特性: 贴壁生长培养条件: L15:LeibovitzMedium优质胎牛血清,10%;0.01mg/ml胰岛素phosphorylated Pyruvate dehydrogenase kinase 1
胰腺再生蛋白3β检测试剂盒生长特性: 悬浮生长培养条件: RPMI1640(w/oHepes)胎牛血清,10%Recombinant Regenerating Islet Derived Protein 3 Beta
白细胞介素27α检测试剂盒生长特性: 贴壁/悬浮生长,混合培养条件: RPMI1640(w/oHepes)优质胎牛血清,10%Interleukin 27α
微粒体甘油三酯运转蛋白检测试剂盒生长特性: 贴壁生长培养条件: RPMI1640(w/oHepes)优质胎牛血清,10%Microsomal triglyceride transfer protein large subunit
同种异体移植炎症因子1检测试剂盒生长特性: 贴壁生长培养条件: RPMI1640(w/oHepes)优质胎牛血清,10%Allograft inflammatory factor 1
源胰腺癌细胞;PAXC-01075330-75-5中文别名:洛伐司他汀;汀洛伐他丁
英文名:Lovastatin
CAS登录号:75330-75-5
分子式:C24H36O4
分子量:404.55
分子结构:
外观:白色结晶粉末
规格:20mg/支
纯度:≥ 98%
用途:用于含量测定/鉴定/药理实验等。
提取来源:化学合成
溶解性:易溶于,溶于,微溶于,不溶于水。
药理药效:降药物和HMG-COA还原酶的竞争性抑制剂,一种对合成的速率限制酶,阻止和的关键化合物甲羟(mevalonate)。该产品是PGP和CYP3A的底物。它增加细胞对抗癌药物的耐药性,如,诱导骨髓瘤细胞凋亡,该产品诱导众多癌细胞凋亡,部分通过抑制RHO家族GTP酶。它会导致细胞周期在G1和G2/M期被捕获。
贮存条件: 4℃冷藏、密封、避光
有效期: 2年