细胞名称 大鼠肺成纤维样细胞;RL1
形态特性: 成纤维细胞样
生长特性: 贴壁生长
特征特性: 该细胞系来源于一大鼠的肺组织。2007年由中国科学院昆明细胞库建立。
培养条件: RPMI1640(w/oHepes)15%FBS
传代方法: 1:2传代;3-4天一次
传代情况: P3
冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测: 荧光法(-)
公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究,作为实验项目研究。下列产品详细介绍:
产品名称 | 生长特性 | 货号 |
大鼠肺成纤维样细胞;RL1 | 贴壁生长 | EY-X63803 |
?
冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除细胞消化液。加入含血清的 *细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除细胞消化液后,加入含血清的*培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
C1q肿瘤坏死因子相关蛋白5检测试剂盒细胞名称: 小鼠骨髓瘤细胞;P3X63-Ag8形态特性: 淋巴母细胞C1q And Tumor Necrosis Factor Related Protein 5
磷酯酶Cε链检测试剂盒细胞名称: 小鼠骨髓瘤细胞;P3X63-Ag8.653形态特性: 淋巴母细胞Phospholipase Cε
抗骨骼肌抗体检测试剂盒细胞名称: 小鼠肥大细胞瘤细胞;P815形态特性: 淋巴母细胞样anti-Skeletalmuscle antibody
Ⅱ型胶原代谢产物C2C检测试剂盒细胞名称: 小鼠淋巴瘤细胞;P388D1(IL-1)形态特性: 淋巴母细胞C2C
小而密低密度脂蛋白检测试剂盒细胞名称: 小鼠单核巨噬细胞白血病细胞;RAW264.7[RAW264.7]形态特性: 淋巴母细胞样sdLDL-C
血小板衍化生长因子A检测试剂盒细胞名称: 小鼠间质细胞瘤细胞;MLTC-1形态特性: 上皮细胞Platelet-Derived Growth Factor-A
CXC趋化因子受体5检测试剂盒细胞名称: 小鼠前列腺癌细胞;RM-1形态特性: 上皮样CXC-chemokine receptor 5
水痘-带状疱疹病IgG抗体检测试剂盒细胞名称: 小鼠腹水瘤细胞;S-180形态特性: 圆形Varicella-zoster virus IgG Antibody
水痘-带状疱疹病IgM抗体检测试剂盒细胞名称: 小鼠腹水瘤细胞;SAC-Ⅱb2形态特性: 圆形Varicella-zoster virus IgM Antibody
重组高迁移率族蛋白B1检测试剂盒细胞名称: 小鼠骨髓瘤细胞;Sp2/0-Ag14形态特性: 淋巴母细胞样;圆形Reconstruction High mobility group protein B1
单纯疱疹病2IgM抗体检测试剂盒细胞名称: 小鼠淋巴瘤细胞;EL4.IL-2形态特性: 淋巴母细胞Herpes simplex virus 2 IgM Antibody
单纯疱疹病6IgG抗体检测试剂盒细胞名称: 小鼠前胃癌细胞;MFC形态特性: 上皮细胞样Herpes simplex virus 6 IgG Antibody
单纯疱疹病6IgM抗体检测试剂盒细胞名称: 小鼠骨髓瘤细胞;P3/NSI/1-Ag4-1[NS-1]形态特性: 淋巴母细胞Herpes simplex virus 6 IgM Antibody
单纯疱疹病7IgG抗体检测试剂盒细胞名称: 小鼠腹水瘤细胞;SAC-ⅡC3形态特性: 圆形Herpes simplex virus 7 IgG Antibody
单纯疱疹病7IgM抗体检测试剂盒细胞名称: 小鼠淋巴细胞白血病;L1210形态特性: 淋巴母细胞Herpes simplex virus 7 IgM Antibody
EB病IgM抗体检测试剂盒细胞名称: 小鼠畸胎瘤细胞;P19形态特性: 上皮细胞Ebv IgM Antibody
疱疹病-6型感染检测试剂盒细胞名称: 小鼠肿瘤细胞;C127[C-127]形态特性: 上皮细胞样herpes virus-6
大鼠肺成纤维样细胞;RL1SIM生化管规格:20支详情介绍
卵黄化钠琼脂培养基基础规格:BR250g详情介绍
MUGal肉汤规格:100g用途:用于食品、饮料和饮用水中大肠菌群快速检测计数(GB标准)
肠道菌富集肉汤培养基(USP)规格:250g用途:用于肠杆菌科细菌的选择性增菌培养
BCYE-Cys琼脂基础规格:100g用途:用于军团菌的选择性分离培养(ISO标准)
WILKINS-CHALGREN琼脂规格:250g用途:用于厌氧菌的分离培养