细胞名称 大鼠肌肉成纤维样细胞;RM1
形态特性: 成纤维细胞样
生长特性: 贴壁生长
特征特性: 该细胞系来源于一大鼠的肌肉组织。2007年由中国科学院昆明细胞库建立。
培养条件: RPMI1640(w/oHepes)15%FBS
传代方法: 1:2传代;3-4天一次
传代情况: P4
冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测: 荧光法(-)?
产品名称 | 大鼠肌肉成纤维样细胞;RM1 |
生长特性 | 贴壁生长 |
货号 | EY-X63801 |
产品特点:
1、 使用方便:不需昂贵设备。
2、 可以处理各种细菌菌体,包括新鲜菌液和冰冻菌体。
3、 将蛋白提取的时间缩短至30分钟-1小时。
4、 采用温和的中性裂解组分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。
6、 紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。
7、 蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂;每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本试剂盒中不有EDTA,与金属螯和层析等兼容。
培养操作步骤 :
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
操作流程:
1.1主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生的细胞,以0.25%消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生的细胞用消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。
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巨泌乳素检测试剂盒细胞名称: 人咽鳞癌细胞;FaDu形态特性: 上皮细胞Macroprolactin
AFB1-DNA加合物检测试剂盒细胞名称: 人结直肠腺癌细胞;HCT-15[HCT15]形态特性: 上皮细胞AFB1-DNA
甲胎蛋白1检测试剂盒细胞名称: 人结直肠腺癌上皮细胞;DLD-1形态特性: 上皮细胞Alpha-fetoprotein 1
恢复蛋白检测试剂盒细胞名称: 人癌细胞;MDA-MB-468-06形态特性: 上皮细胞Recoverin
白细胞介素33受体检测试剂盒细胞名称: 人肾透明细胞癌;Caki-1形态特性: 上皮细胞Interleukin 33 Receptor
NSMCE2检测试剂盒细胞名称: 人脑星形胶质母细胞瘤;U-87MG[U87MG;U87MG]形态特性: 上皮细胞NSMCE2
b型流感嗜血杆菌抗体检测试剂盒细胞名称: 人红系白血病细胞;TF-1形态特性: 淋巴母细胞样Haemophilus influenzae type b antibody
抗髓过氧化酶抗体检测试剂盒细胞名称: 人上皮细胞;CaSki形态特性: 上皮细胞Anti-myeloperoxidase deficiency Antibody
转化蛋白RhoA检测试剂盒细胞名称: 人Burkkit淋巴瘤细胞;Daudi形态特性: 淋巴母细胞Transforming Protein RhoA
东南亚α-地中海贫血Zeta球蛋白链检测试剂盒细胞名称: 人导管瘤细胞;BT-474形态特性: 上皮细胞Southeast Asian α-thalassemia zeta globin chains
BK病检测试剂盒细胞名称: 人肺退行性癌细胞;Calu-6形态特性: 上皮细胞BK virus
BK病特异性IgG抗体检测试剂盒细胞名称: 人结直肠腺癌细胞;Caco-2形态特性: 上皮细胞BK virus IgG Antibody
整合素αVβ1检测试剂盒细胞名称: 人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞;CCRF-CEM[CCRFCEM]形态特性: 淋巴母细胞ITG αⅤβ1
25羟基7α-羟化酶检测试剂盒细胞名称: 人内膜腺癌细胞;HEC-1-A形态特性: 上皮细胞样Cholesterol in mice 7 alpha hydroxylase
27羟基检测试剂盒细胞名称: 人神经母细胞瘤细胞;IMR-32形态特性: 神经母细胞,成纤维细胞27-Hydroxycholesterol
整合素αV检测试剂盒细胞名称: 人肺癌细胞;A549[A-549]形态特性: 上皮细胞Integrin Alpha 5
囊尾蚴病抗体检测试剂盒细胞名称: 人癌细胞;HCC1937形态特性: 上皮细胞样Cysticercosis cellulosae Antibody
大鼠肌肉成纤维样细胞;RM1抗生素5号规格:250g用途:用于检定菌种培养
PBS缓冲液(PH7.4)规格:250g用途:用于检测李斯特氏菌时样品的制备
李氏菌增菌肉汤(LB1,LB2)基础颗粒规格:250g拉丁属名:Listeria Enrichment Broth Base
麦芽汁培养基规格:250g用途:用于霉菌和酵母菌增菌培养
脑心浸液肉汤(BHI)规格:250g用途:用于营养苛求细菌的增菌培养
性蛋白胨水规格:250g用途:用于霍乱弧菌选择性增菌培养(SN标准)