公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究,作为实验项目研究。下列产品详细介绍:
产品名称 | 生长特性 | 货号 |
胚肝二倍体细胞;CCC-HEL-1 | 贴壁生长 | EY-X63388 |
细胞名称 胚肝二倍体细胞;CCC-HEL-1
形态特性: 上皮细胞样
生长特性: 贴壁生长
特征特性: 取材自引产的15周胚胎组织,中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心建立。
培养条件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)20%FBS
传代方法: 1:3传代;3~4天1次。
传代情况: P6
冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测: 培养法(-)
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冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大??;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
Cas9稳定表达
胚肺成纤维样(男)拉丁属名: Pseudomonas sp.5-氟-2-Human RFTN1 ELISA Kit
人胚肺成纤维(女)注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用3-氟-4-Human RFX3 ELISA Kit
人胚皮肤成纤维拉丁属名: Herbidospora osyris3-氟-4-Human RFWD3 ELISA Kit
人T淋巴白血病注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用2-氟-3-甲基吡啶Human RFTN2 ELISA Kit
EBV-转化人淋巴(彝族)注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用2-氟-3-甲基吡啶Human RFX5 ELISA Kit
人肺癌腺癌用途: 溶磷、固氮2-氟-5-甲基吡啶Human RFXAP ELISA Kit
人视网膜周-永生化拉丁属名: Saccharomyces cerevisiae2-氟-5-甲基吡啶Human RGS1(Regulator of G-protein signaling 1) ELISA Kit
大鼠表皮角质(新生)-永生化拉丁属名: Phaffia rhodozyma M.W.Mill. Yoney.&Soneda3-硝基-7-氮杂吲哚Human RGR ELISA Kit
人骨骼肌成肌-永生化拉丁属名: Candida blackwellae环基溴化镁Human RGMA ELISA Kit
人视网膜微血管内皮-永生化拉丁属名: rhuriopathiae4-乙氧基肉桂酸Human REX1 ELISA Kit
人低侵袭性脉络膜黑色素素瘤拉丁属名: Bacillus subtilis4-乙氧基肉桂酸Human RERG ELISA Kit
人前列腺癌高转拉丁属名: Streptococcus equinus3,3'-二羟基联苯Human REXO4 ELISA Kit
人多功能干注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用3,3'-二羟基联苯Human RFC2 ELISA Kit
人胚肾拉丁属名: Bacillus thuringiensis4-氨基-3-羟基苯甲酸Human REXO2 ELISA Kit
人白血病拉丁属名
胚肝二倍体细胞;CCC-HEL-1犬乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA试剂盒HSVⅠ-AbELISAKit产品规格:48T/96T。
犬白细胞分化抗原6(CD6)ELISA试剂盒HSVⅡ-AbELISAKit产品规格:48T/96T。
犬白细胞分化抗原8(CD8)ELISA试剂盒HSVⅡ-AbELISAKit产品规格:48T/96T。
猴子神经胶质纤维性蛋白(GFAP)ELISA试剂盒HSV-Ag1ELISAKit产品规格:48T/96T。
猴子巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA试剂盒HSV-Ag2ELISAKit产品规格:48T/96T。
猴子肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体3(TRAIL-R3)ELISA试剂盒HTLV-ⅠELISAKit产品规格:48T/96T。
猴子α1微球蛋白(α1-MG)ELISA试剂盒HumanActivinAELISAKit产品规格:48T/96T。
猴子基质金属蛋白酶11(MMP11)ELISA试剂盒HumanAgrinELISAKit产品规格:48T/96T。
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除细胞消化液。加入含血清的 *细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除细胞消化液后,加入含血清的*培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。