公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究,作为实验项目研究。下列产品详细介绍:
产品名称 | 生长特性 | 货号 |
豹猫肺成纤维样细胞;LCL1 | 贴壁生长 | EY-X63793 |
细胞名称 豹猫肺成纤维样细胞;LCL1
形态特性: 成纤维细胞样
生长特性: 贴壁生长
特征特性: 该细胞系来源于一雌性豹猫的肺组织。1985年由中国科学院昆明细胞库建立。
培养条件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)20%NBS
传代方法: 1:2传代;3-4天一次
传代情况: P3
冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测: 荧光法(-)
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冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
K-Ras检测试剂盒细胞名称: 小鼠神经母细胞瘤细胞与大鼠胶质瘤细胞之融合细胞;NG108-15[108CC15]形态特性: 扁平;圆形;10到100微米直径K-Ras
nm23-H1检测试剂盒细胞名称: 小鼠杂交瘤细胞CD25;PC615.3[PC61;PC61.5.3]形态特性: 淋巴母细胞样nm23-H1
溶组织阿米巴IgA检测试剂盒细胞名称: 小鼠杂交瘤细胞;AE-1形态特性: 淋巴母细胞样Entamoeba histolytica Schaudinn IgA
丙型肝炎IgM抗体检测试剂盒细胞名称: 小鼠杂交瘤细胞;AE-2形态特性: 淋巴母细胞样Hepatitis C virus IgM
抗肌动蛋白抗体IgG检测试剂盒细胞名称: 小鼠杂交瘤细胞(抗人肺腺癌);LC-2-01形态特性: 淋巴母细胞样anti-Actin antibody IgG
4-羟基丙双加氧酶检测试剂盒细胞名称: 中国仓鼠X小鼠B淋巴细胞杂交瘤;MR1[derivativeofHB-11048]形态特性: 淋巴母细胞样4-Hydroxyphenylpyruvate Dioxygenase
COP9结构光形态发生同源物亚基2检测试剂盒细胞名称: 小鼠杂交瘤细胞;35.1形态特性: 淋巴母细胞样COPS2
COP9结构光形态发生同源物亚基2抗体检测试剂盒细胞名称: 小鼠杂交瘤细胞;OKT11形态特性: 淋巴母细胞样COPS2 antibody
RIG-I检测试剂盒细胞名称: 人肾透明细胞腺癌细胞;786-O[786-0]形态特性: 上皮细胞RIG-I
柯萨奇病B3检测试剂盒细胞名称: 人肺癌细胞;A549[A-549]形态特性: 上皮样;多角形Coxsackie virus B3
DNA甲基转移酶3A2检测试剂盒细胞名称: 人恶性黑色素瘤细胞;A-375[A375]形态特性: 上皮样DNA methyltransferase 3A2
雌激素受体γ检测试剂盒细胞名称: 人T淋巴细胞白血病细胞;6T-CEM形态特性: 淋巴母细胞Estrogen Receptorγ
酪氨氨基转移酶检测试剂盒细胞名称: 人膀胱癌细胞;5637(HTB-9)形态特性: 上皮细胞tyrosine aminotransferase
血小板CD41-IgG抗体检测试剂盒细胞名称: 人胃腺癌细胞;AGS形态特性: 上皮细胞PA-CD41IgG antibody
血小板相关IgG抗体检测试剂盒细胞名称: 人横纹肌肉瘤细胞;A-673[A673]形态特性: 成纤维细胞Platelet associated IgG antibody
胃脂酶检测试剂盒细胞名称: 人癌细胞;Bcap-37形态特性: 上皮细胞样gastric lipase
干扰素-a-2b检测试剂盒细胞名称: 人胰腺癌细胞;AsPC-1形态特性: 上皮样Interferon α-2b
豹猫肺成纤维样细胞;LCL1SCDLP液体培养基管规格:5ml*20支用途:用于化妆品的样品制备以及前增菌
CAYE培养基规格:250g用途:用于致病性大肠埃希氏菌的分离培养基
酪蛋白胨大豆吐温20培养基规格:250g用途:用于药品(含防腐剂)的中和剂
/药敏纸片 别名:复方新诺明规格:23.75ug/1.25ug/片,20片/瓶拉丁属名:Trimethoprim/Sulfamethoxazole(SXT)
药敏纸片规格:30μg/片,20片/瓶拉丁属名:Aztreonam(AZT)
乳酚棉蓝染色液规格:5ml*8用途:用于真菌染色
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除细胞消化液。加入含血清的 *细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除细胞消化液后,加入含血清的*培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。