细胞名称 肾细胞腺癌细胞;ACHN
形态特性: 上皮细胞样
生长特性: 贴壁生长
特征特性: 该细胞1979年建系,源自一名22岁患有肾细胞腺癌的白人男性的胸腔积液。干扰素可抑制该细胞的生长,该细胞多用于干扰素及其诱导剂的抗增殖研究。
培养条件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS
传代方法: 1:2~1:3传代,2~3天换液一次
传代情况: C2
冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测: 培养法(-)
公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究,作为实验项目研究。下列产品详细介绍:
产品名称 | 生长特性 | 货号 |
肾细胞腺癌细胞;ACHN | 贴壁生长 | EY-X63833 |
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冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除细胞消化液。加入含血清的 *细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除细胞消化液后,加入含血清的*培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
8-羟基糖苷酶1检测试剂盒胎干细胞;E1C4形态特性: 上皮细胞样8-oxoguanine glycosydase
抗Chitobioside糖IgA抗体检测试剂盒胚胎干细胞;E1C1形态特性: 上皮细胞样ACCA--IgA Ab
酿酒酵母IgA抗体检测试剂盒细胞名称: 小鼠杂交瘤细胞;BDRXN-2形态特性: 淋巴母细胞样Anti-Saccharomyces cerevisiae antibody IgA
大肠菌素检测试剂盒细胞名称: 小鼠杂交瘤细胞;BmIFV-4E12形态特性: 淋巴母细胞样colicin
T复合体相关表达3检测试剂盒细胞名称胚肺转化细胞;SL-1形态特性: 成纤维细胞样T-complex associated testis expressed3
动力蛋白1重链7检测试剂盒细胞源杂交瘤细胞株;PsL-EGFmAb-2形态特性: 淋巴母细胞样Recombinant Dynein
流感病A IgG抗体检测试剂胎干细胞;HES3.2形态特性: 上皮细胞样Influenza viruses A IgG antibody
血管非炎性蛋白1检测试剂癌细胞株;HepG2-RHBV形态特性: 上皮细胞样Non inflammatory protein 1
卵巢癌抗原X1检测试剂盒细胞名称: 小鼠杂交瘤细胞;HAb18Gedomab2形态特性: 淋巴母细胞样OVX1
梅检测试剂盒细胞名称: 小鼠杂交瘤细胞;20A11形态特性: 淋巴母细胞样TPPA
沙眼衣原体IgG抗体检测试剂盒细胞名称: 小鼠杂交瘤细胞;7C3形态特性: 淋巴母细胞样Chlamydia trachomatis igG
细胞信号转导分子3检测试剂盒细胞名称: 小鼠杂交瘤细胞;GZHMD1F10形态特性: 淋巴母细胞样SMAD-3
胃癌相关抗原mg检测试剂盒细胞名称: 小鼠杂交瘤细胞;8G9形态特性: 淋巴母细胞样MGS
脑膜炎奈瑟氏球菌IgM抗体检测试剂盒细胞名称: 小鼠杂交瘤细胞;2A6形态特性: 淋巴母细胞样N.meningitidis IgM
黑色素瘤相关抗原D4检测试剂盒细胞名称: 小鼠杂交瘤细胞;WNSs239F1A8形态特性: 淋巴母细胞样Melanoma-associated antigen D4
白细胞介素1受体样1检测试剂盒细胞名称: 小鼠杂交瘤细胞;13D4形态特性: 淋巴母细胞样Interleukin 1 Receptor1
黑色素瘤相关抗原D4抗体检测试剂盒细胞名称: 小鼠杂交瘤细胞;HJY-2ant_HLA-G形态特性: 淋巴母细胞样Melanoma-associated antigen D4 antibody
肾细胞腺癌细胞;ACHN鼠李糖发酵管c规格:10支/盒用途:用于阪崎肠杆菌的生化鉴定。
3%化钠MR-VP生化管规格:10支/盒用途:用于副溶血性弧菌的生化鉴定(GB)。
6%盐胨水规格:10支/盒用途:用于副溶血性弧菌的生化鉴定。
鸟氨脱羧酶b规格:10支/盒用途:用于阪崎杆菌的生化鉴定。
水杨苷发酵管规格:10支/盒用途:用于志贺氏菌的生化鉴定。
粘液盐(测试肉汤)规格:10支/盒用途:用于志贺氏菌的生化鉴定。