实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究，作为实验项目研究。下列产品详细介绍：
产品名称 | 生长特性 | 货号 |
小菊头蝠皮肤成纤维样细胞；LHBS3 | 贴壁生长 | EY-X63817 |
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细胞名称 小菊头蝠皮肤成纤维样细胞；LHBS3
形态特性: 成纤维细胞样
生长特性: 贴壁生长
特征特性: 该细胞系来源于一雄性小菊头蝠的皮肤组织。2005年由中国科学院昆明细胞库建立。
培养条件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS
传代方法: 1:2传代；3-4天一次
传代情况: P3
冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测: 荧光法（-）
冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除细胞消化液。加入含血清的 *细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除细胞消化液后，加入含血清的*培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
免疫球蛋白G4抗体检测试剂盒细胞名称: 小鼠杂交瘤细胞；13D8形态特性: 淋巴母细胞样Immunoglobulin G4 antibody
EB病Zta蛋白IgA抗体检测试剂盒细胞名称: 人癌细胞；BC－028形态特性: 上皮样细胞EB-Zta-IgA
活化VIIa检测试剂盒细胞名称: 小鼠杂交瘤细胞；4E-BP1形态特性: 淋巴母细胞样activated coagulation factorⅦa
C型胶原蛋白检测试剂盒细胞名称: 小鼠杂交瘤细胞；ABL2形态特性: 淋巴母细胞样Collagen Type C
20-羟基蜕皮激素检测试剂盒细胞名称: 小鼠杂交瘤细胞；Akt2形态特性: 淋巴母细胞样20-Hydroxyecdysone
晚期糖基化终产物特异性受体检测试剂盒细胞名称: 小鼠杂交瘤细胞；Akt3形态特性: 淋巴母细胞样the receptor of advanced glycation endproducts
骨成型蛋白3检测试剂盒细胞名称: 小鼠杂交瘤细胞；AMACR形态特性: 淋巴母细胞样Bone morphogenetic protein 3
肺炎支原体IgG抗体检测试剂盒细胞名称: 小鼠杂交瘤细胞；形态特性: 淋巴母细胞样Mhyopneumoniae antibody IgG
涎液化糖链抗原6检测试剂盒细胞名称: 小鼠杂交瘤细胞；形态特性: 淋巴母细胞样Krebs von den Lungen-6
氨基肽酶A检测试剂盒细胞名称: 小鼠杂交瘤细胞；APOA1形态特性: 淋巴母细胞样Aminopeptidase A
二酰甘油 -O-酰基转移酶同源物 2检测试剂盒细胞名称: 小鼠杂交瘤细胞；APOA5形态特性: 淋巴母细胞样Two glycerol acyltransferase -O- homolog 2
K-Ras抗体检测试剂盒细胞名称: 小鼠杂交瘤细胞；ApoM形态特性: 淋巴母细胞样K-RasAb
生存素抗体检测试剂盒细胞名称: 小鼠杂交瘤细胞；BCL-10形态特性: 淋巴母细胞样survivinAb
nm23-H1抗体检测试剂盒细胞名称: 小鼠杂交瘤细胞；BLK形态特性: 淋巴母细胞样nm23-H1Ab
酪氨蛋白激酶受体A5检测试剂盒细胞名称: 小鼠杂交瘤细胞；APP形态特性: 淋巴母细胞样Tyrosine protein kinase receptor A5
膜联蛋白-A4检测试剂盒细胞名称: 小鼠杂交瘤细胞；AURKB形态特性: 淋巴母细胞样Annexin A4
膜联蛋白-A7检测试剂盒细胞名称: 小鼠杂交瘤细胞；BRAF形态特性: 淋巴母细胞样Annexin A7
小菊头蝠皮肤成纤维样细胞；LHBS3含225ml mEC+n肉汤均质袋规格：10个/包用途：用于大肠杆菌O157菌前增菌培养
CC琼脂添加剂规格：1ml*5支用途：每支添加于90mlCC琼脂基础中
改良月桂基硫盐胰蛋白胨肉汤-,(mLST-Vm)颗粒规格：300ml/袋*10用途：用于阪崎杆菌选择性增菌培养
精氨双水解酶肉汤规格：20支详情介绍
乳糖蛋白胨培养液（含小倒管）规格：10ml*20支/包用途：用于大肠菌群、大肠杆菌的测定
SCDLP液体培养基管规格：5ml*20支用途：用于化妆品的样品制备以及前增菌
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