我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌；部分产品现货，超低比价，产品名称货期短，价格优，售后齐全。
产品名称 | 小鼠胚胎成纤维细胞；NIH/3T3 |
生长特性 | 贴壁生长 |
货号 | EY-X63225 |
细胞名称 小鼠胚胎成纤维细胞；NIH/3T3
形态特性: 成纤维细胞样
生长特性: 贴壁生长
特征特性: NIH/3T3是从NIHSwiss小鼠胚胎培养物中建立的高度接触性抑制的连续传代细胞株。为了培育在形态学特征上更适合于进行转化分析的亚株，建立的NIH/3T3细胞株又进行了5轮以上亚。该细胞株对肉瘤病毒的转化灶形成和白血病病毒的繁殖高度敏感，对DNA转化及转染研究十分有用。鼠痘病毒阴性。
培养条件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%小牛血清
传代方法: 当细胞生长至80%或80%以下汇合时即可传代，切勿达到汇合；1:3~1:6传代，每周2次。
传代情况: C5
冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测: 培养法（-）
?
产品特点:
1、 使用方便:不需昂贵设备。
2、 可以处理各种细菌菌体，包括新鲜菌液和冰冻菌体。
3、 将蛋白提取的时间缩短至30分钟-1小时。
4、 采用温和的中性裂解组分，保持蛋白活性。
5、 含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。
6、 紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。
7、 蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本试剂盒中不有EDTA，与金属螯和层析等兼容。
培养操作步骤 ：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
操作流程：
1.1主要试剂与仪器：倒置相差显微镜（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存：
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek－293细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生的细胞，以0.25％消化成单细胞悬液，计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ，计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生的细胞用消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。
SV40T转化的人胚肾细胞（亚系）；293T/17形态特性: 上皮样生长特性: 贴壁生长Human TRANCE ELISA KIT
人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞；C918形态特性: 多角生长特性: 贴壁生长Human PDK ELISA KIT
小鼠T淋巴细胞；Cl.Ly1+2-/9形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 悬浮生长Mouse Cystatin C ELISA KIT
人髓母细胞瘤细胞；Daoy形态特性: 多角生长特性: 贴壁生长Human IL-34 ELISA KIT
人导管癌细胞；HCC38形态特性: 上皮样生长特性: 贴壁生长Human M-CSF ELISA KIT
大鼠胚胎心肌细胞；H9c2(2-1)形态特性: 成肌细胞样生长特性: 贴壁生长Chicken IL-2 ELISA Kit
大鼠骨髓瘤细胞；IR983F形态特性: 圆形生长特性: 悬浮生长Human IL-19 ELISA KIT
小鼠肾集合管细胞(SV40转化)；M-1形态特性: 上皮样生长特性: 贴壁生长Mouse CXCL12 ELISA KIT
小鼠单核巨噬细胞；J774A.1形态特性: 单核细胞/巨噬细胞样生长特性: 贴壁生长Human ACE ELISA KIT
人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞；M619形态特性: 多角生长特性: 贴壁生长Human MMP-2 ELISA KIT
狗肾细胞隆突型；MDCKsuperdome形态特性: 上皮样生长特性: 贴壁生长Bovine 14-3-3 eta ELISA Kit
大鼠气管上皮细胞；RTE形态特性: 多角生长特性: 贴壁生长Human CD23 ELISA KIT
绿色荧光蛋白标记小鼠前胃癌细胞；MFC-GFP形态特性: 上皮样生长特性: 贴壁生长Mouse Galectin-3 ELISA KIT
人胃癌细胞；MGC-803形态特性: 上皮样生长特性: 贴壁生长Human GDF-15 ELISA KIT
绿色荧光蛋白标记人细胞；HeLa-GFP形态特性: 上皮样；多角生长特性: 贴壁生长Human CCL5 ELISA KIT
人胃癌细胞；MKN-45形态特性: 圆形生长特性: 贴壁生长Mouse Renin-1 ELISA KIT
小鼠胚胎成纤维细胞；NIH/3T3小鼠糖化血红蛋白A1c(A1c)ELISA试剂盒ACPELISAKit产品规格:48T/96T。
小鼠胰岛素受体β(ISR-β)ELISA试剂盒AcSDKPELISAKit产品规格:48T/96T。
小鼠促肾上皮质激素释放激素(CRH)ELISA试剂盒AcSDKPELISAKit产品规格:48T/96T。
小鼠促甲状腺素释放激素(TRH)ELISA试剂盒AcSDKPELISAKit产品规格:48T/96T。
小鼠抑制素B(INH-B)ELISA试剂盒ACTHELISAKit产品规格:48T/96T。
小鼠释放激素(GnRH)ELISA试剂盒ACTHELISAKit产品规格:48T/96T。
小鼠血栓前体蛋白(TpP)ELISA试剂盒ACTHELISAKit产品规格:48T/96T。
小鼠核因子κB受体活化因子配基(RANKL)ELISA试剂盒ACTHELISAKit产品规格:48T/96T。
点击放大
