实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究，作为实验项目研究。下列产品详细介绍：
产品名称 | 生长特性 | 货号 |
肾腺癌细胞；ACHN | 贴壁生长 | EY-X63628 |
?
细胞名称 人肾腺癌细胞；ACHN
形态特性: 上皮细胞样
生长特性: 贴壁生长
特征特性: ACHN细胞系建系于1979年，衍生于一个患恶性肾癌的22岁男性白人病料。细胞系在MNM培养液中稳定传代150天，然后大量增殖接种裸鼠，4周后产生明显的局部浸染性肿瘤。干扰素可抑制该细胞系增殖，因此，ACHN细胞可用于人干扰素和干扰素诱导剂的抗细胞增殖研究。
培养条件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS；1%NEAA
传代方法: 1:3传代,2-3天传一代
传代情况: C31
冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测: 阴性
冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除细胞消化液。加入含血清的 *细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除细胞消化液后，加入含血清的*培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
Salmonella enterica subsp.enterica (e ..细胞名称: 杂交瘤细胞株；
H唑Human PROSC ELISA Kit
人永生化淋巴拉丁属名: Bacillus subtilis魏因勒卜链接剂Human PRPF3 ELISA Kit
人类成纤维拉丁属名: Saccharomycopsis fibuligera4-吡咯烷丁Human ZNF335(Zinc finger protein 335) ELISA Kit
人胚胎膀胱组织来源拉丁属名: Aspergillus usamii6-甲氧基-2-四氢萘酮Human PRPF40A ELISA Kit
人胚胎气管组织来源拉丁属名: Aspergillus niger6-甲氧基-2-四氢萘酮Human PRKX ELISA Kit
人胚肾二倍体拉丁属名: subtilis四正丁基硫酸铵Human PRMT1 ELISA Kit
胎儿骨髓间充质（自建）拉丁属名: Pichia galeiformis1,3-二(4-氨苯氧基)苯Human PRPF40B ELISA Kit
人皮肤成纤维拉丁属名: coli1,3-二(4-氨苯氧基)苯Human PRPF6 ELISA Kit
人脐静脉内皮拉丁属名: Sporosarcina psychrophila三Human PRMT5(Protein arginine N-methyltransferase 5) ELISA Kit
人男性正常拉丁属名: Agrobacterium rhizogenes(Riker et al.)Conn三Human PRMT8 ELISA Kit
人腹膜微血管内皮注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用Boc-Orn(Z)-OHHuman PRMT3 ELISA Kit
人类皮肤纤维母拉丁属名: Auricularia fuscosuccineaBoc-Orn(Z)-OHHuman PRMT6 ELISA Kit
人肺微血管内皮拉丁属名: Paenibacillus thailandensis原酸*酯Human PRPF40A ELISA Kit
人脐带动脉内皮拉丁属名: Talaromyces stipitatus原酸*酯Human PRKX ELISA Kit
人小肠上皮拉丁属名: Bacillus megateriumLaquinimodHuman Presenilin-1 ELISA Kit
人肠平滑肌拉丁属名: Bacillus amyloliquefaciens烯基三丁基锡Human PREPL ELISA Kit
人脐静脉血管内皮注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用烯基三丁基锡Human PREP(Prolyl endopeptidase) ELISA Kit
肾腺癌细胞；ACHNL-丝氨规格：5g用途：微生物指示剂
四环素药敏纸片规格：30ug/片，20片/瓶用途：用于药物体外敏感性试验
RVS 肉汤规格：250g用途：用于食品中沙门氏菌检验选择性增菌(ISO标准)
甘露糖 a规格：20 支详情介绍
葡萄糖规格：20支详情介绍
10% 纤维二糖水溶液规格：5mL/支×10详情介绍
点击放大
