细胞名称 肺巨细胞癌高转移系；PGBE1
形态特性: 上皮细胞样
生长特性: 贴壁生长
特征特性: PGBE1由朱伟勇和郑杰于1995年建系。源自人肺巨细胞癌系分离了多个单细胞，经体外侵袭实验和裸鼠体内接种相结合进行了初步鉴定后，挑选其中３个化细胞亚系之一。该细胞在裸鼠体内的成瘤率均为１００，淋巴结转移率为９４％。
培养条件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS
传代方法: 1:3传代,2-3天传一代
传代情况: C7
冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测: 阴性
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产品名称 | 肺巨细胞癌高转移系；PGBE1 |
生长特性 | 贴壁生长 |
货号 | EY-X64030 |
产品特点:
1、 使用方便:不需昂贵设备。
2、 可以处理各种细菌菌体，包括新鲜菌液和冰冻菌体。
3、 将蛋白提取的时间缩短至30分钟-1小时。
4、 采用温和的中性裂解组分，保持蛋白活性。
5、 含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。
6、 紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。
7、 蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本试剂盒中不有EDTA，与金属螯和层析等兼容。
培养操作步骤 ：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
操作流程：
1.1主要试剂与仪器：倒置相差显微镜（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 细胞的复苏培养传代及冻存：
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek－293细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生的细胞，以0.25％消化成单细胞悬液，计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ，计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生的细胞用消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。
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信号素4A检测试剂盒生长特性: 贴壁生长培养条件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBSSEMA4A
去唾液糖蛋白受体检测试剂盒生长特性: 半贴壁生长培养条件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSasialoglycoprotein receptor
3-甲氧基肾上腺素检测试剂盒生长特性: 贴壁生长培养条件: DMEM/F12(1:1):Ham'sF12/DMEMedium(DMEH-16/F-1250%Mixturew/oHEPES,withNEAAMedium)10%FBS3-metanephrine
核糖核IgG抗体检测试剂盒生长特性: 半贴壁生长培养条件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSAnti-RNA IgG
磷化雷帕霉素靶蛋白检测试剂盒生长特性: 半贴壁生长培养条件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSp-mammalian target of rapamyein
死骨片1检测试剂盒生长特性: 半贴壁生长培养条件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSSQSTM1
自噬基因Beclin 1检测试剂盒生长特性: 半贴壁生长培养条件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSBeclin 1
自噬相关蛋白5检测试剂盒生长特性: 半贴壁生长培养条件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSAPG5
微管相关蛋白1A;1B轻链3B检测试剂盒生长特性: 半贴壁生长培养条件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSMicrotubule-associated proteins 1A;1B light chain 3B
低密度脂蛋白受体相关蛋白1检测试剂盒生长特性: 半贴壁生长培养条件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSlow-density lipoprotein-receptor-related protein 1
磷化乙酰辅酶A检测试剂盒生长特性: 半贴壁生长培养条件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSPhosphorylation Acetyl coenzyme A
鞘磷脂合成酶1检测试剂盒生长特性: 半贴壁生长培养条件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSSphingomyelinsynthase 1
血小板内皮细胞粘附分子6检测试剂盒生长特性: 半贴壁生长培养条件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSPlatelet;Endothelial Cell Adhesion Molecule 6
中性粒细胞胞外诱捕网络检测试剂盒生长特性: 半贴壁生长培养条件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSneutrophil extracellular traps
3羟基3甲基戊二酰合酶1检测试剂盒生长特性: 半贴壁生长培养条件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSHMG-CoA synthase 1
丙检测试剂盒生长特性: 半贴壁生长培养条件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSpropanoic acid
连蛋白抗体检测试剂盒生长特性: 半贴壁生长培养条件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSzonulin antibody
肺巨细胞癌高转移系；PGBE1原花青素4852-22-6英文名：Proanthocyanidins
英文别名：Oligomeric Proantho Cyanidins（OPC）
CAS登录号：4852-22-6
分子式：C30H26O12
分子量：578.53
分子结构：
外观：红棕色粉末
规格：20mg/支
纯度：≥ 98%
用途：用于含量测定/鉴定/药理实验等。
提取来源：葡萄籽提取物或法国海岸松树皮提取物。
溶解性：溶于水和大多有机溶剂。
药理药效：原花青素（葡萄籽提取物）是一种新型高效抗氧化剂，是目前为止所发现的强效的自由基清除剂，具有非常强的体内活性。用于改善血液循环、治疗糖尿病性视网膜病、减轻水肿和抑制静脉曲张等，防止糖尿病患者白内障手术后的并发症，消除水肿， 滋润皮肤。花青素和维生素C的组合可以使分解，作为心脏保护剂等。
贮存条件： 4℃冷藏、密封、避光
有效期： 2年
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