综合微生物的培养方法,包括以下步骤:
(1)前期准备:(A)灭菌处理;(B)制备Biolite水;(C)检查设备和材料;
(2)按比例配制培养材料;
(3)导入曝气,进行繁殖培养;
(4)取液观察;(a)取液;(b)稀释菌液;(c)平板培养;
(5)分离并检测;
(6)取液储存;通过该综合微生物培养方法简单可操作性强,培养的综合微生物均在3代以内,菌类稳定不发生突变,且繁殖快速。
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规格参数:
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
克鲁斯假丝酵母品牌 | Candida kr | EY-J963341 |
资源名称: 克鲁斯假丝酵母
种属: Candida krusei
提供形式: 冻干物
安全等级: 1
模式菌株: no
应用领域: 高温生香酵母。
培养基: 5 °Bé麦芽汁琼脂:5°Bé麦芽汁 1.0L,琼脂 15.0g,自然pH。121℃,15min。
生长条件: 28-30℃,好氧
存储条件: 真空冷冻干燥法
低温存法:
①简单保存法,将琼脂斜面孢子培养物、菌丝悬浮液以及由麸皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培养物置于4℃冰箱保存,保存时间不超过1~2个月,若将谷物原料制备的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蜡,以隔绝外界空气和水汽,保持时间可达3~4个月;②液氮超低温保存法,将生长稳定期的细胞悬浮在10%甘油或其他低冰点液体中,密封于安瓿管内,然后控制冷却速度,使安瓿管温度逐步下降至 -35℃时,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多数微生物如病毒、噬菌体、多种细菌、放线菌、酵母和原虫、特别是一些用冷冻干燥法有困难的微生物,都可用此法保存。
微生物菌种的培养:
⒈ 孢子制备
⑴ 放线菌孢子的制备
一般采用琼脂斜面培养基,培养基中含有一些适合产孢子的营养成分,如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1%,氮源不超过0.5%),碳源丰富容易造成酸性的营养环境,不利于放线菌孢子的形成,氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下,干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。放线菌斜面的培养温度大多数为28 ℃,少数为37 ℃,培养时间为5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制备
霉菌的孢子培养,一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖,而且这类培养基的表面积较大,可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25~28 ℃,培养时间为4~14天。
⒉ 种子制备
⑴ 摇瓶种子制备
摇瓶种子进罐,常采用母瓶、子瓶两级培养,有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和*,并易被菌体分解利用,氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓,子瓶培养基浓度比母瓶略高,更接近种子罐的培养基配方。
⑵ 种子罐种子制备
种子罐种子制备的工艺过程,因菌种不同而异,一般可分为一级种子、二级种子和三级种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中,经培养后形成大量的菌丝,这样的种子称为一级种子,把一级种子转入发酵罐内发酵,称为二级发酵。如果将一级种子接入体积较大的种子罐内,经过培养形成更多的菌丝,这样制备的种子称为二级种子,将二级种子转入发酵罐内发酵,称为三级发酵。同样道理,使用三级种子的发酵,称为四级发酵。
Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus 中文名称:德氏乳杆菌保加利亚亚种Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus提供形式:冻干管;1mL菌液;安全等级:1模式菌株:no应用领域:奶培养方法培养基:MRS培养基::酪胨 10.0g,牛肉 8.0g,酵母 4.0 g,葡萄糖 20.0 g,镁 0.2 g,钠 5.0 g,柠檬三铵 2.0 g,磷氢二钾 2.0 g,锰 0.05 g,吐温80 1.0 g,蒸馏 1000mL。pH6.2±0.2。传代方法①冻干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂轮在冻干管壁划两圈,掰断,用200μL无菌或培养基:充分溶解,平板涂布,活化培养。 ②斜面:试管口用75%酒精擦拭后,火焰灼烧,后用无菌接种铲切块,挑取接入平板或斜面,培养。生长条件:37℃,厌氧。生长特性G+,菌体长杆状,两端钝圆,链状排列,无芽胞,有异染粒。菌落圆形,表面粗糙,突起,边缘整齐,浅黄色,不透明。发酵葡萄糖、果糖,不发酵木糖、蔗糖、阿拉伯糖。从葡萄糖盐产,接触酶阴性,牛奶反应产、凝,兼性厌氧。15℃不生长,45℃生长。产乳。存储条件:2-8℃冷藏 纯度:99%
Acetobacr sp. 中文名称:醋菌Acetobacr sp.提供形式:冻干管,斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:氧化乙醇产醋培养方法培养基:醋菌培养基::Glucose (葡萄糖) 100g Yeasst extract (酵母膏) 10g CaCO3 20g Agar (琼脂) 15g Distilled war (蒸馏) 1000ml Adjust (调) pH to 6.8传代方法①冻干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂轮在冻干管壁划两圈,掰断,用200μL无菌或培养基:充分溶解,平板涂布,活化培养。 ②斜面:试管口用75%酒精擦拭后,火焰灼烧,后用无菌接种铲切块,挑取接入平板或斜面,培养。生长条件:30℃,好氧存储条件:2-8℃冷藏 纯度:99%
Agrobacriumrhizogenes(Rikeretal.)Conn 中文名称:发根土壤杆菌(发根植物单胞菌)Agrobacriumrhizogenes(Rikeretal.)Conn安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:9生长条件:25-28℃ 纯度:≥98%
Lactobacillus plantarum 中文名称:植物乳杆菌Lactobacillus plantarum提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:研究;分析检测。检测烟、泛、。培养方法培养基:MRS培养基::酪胨 10.0g,牛肉 8.0g,酵母 4.0 g,葡萄糖 20.0 g,镁 0.2 g,钠 5.0 g,柠檬三铵 2.0 g,磷氢二钾 2.0 g,锰 0.05 g,吐温80 1.0 g,蒸馏 1000mL。pH6.2±0.2。生长条件:37℃,微好氧存储条件:2-8℃ 纯度:97%
Alcaligenes│faecalis 中文名称:葱头伯克氏菌Alcaligenes│faecalis提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:化妆品抗菌培养方法培养基:CM0002生长条件:28℃存储条件:真空冷冻干燥法;定期移植法 纯度:97%
IymomonasmobilisKluyverandVanNiel 中文名称:运动发酵单孢菌IymomonasmobilisKluyverandVanNiel安全等级:1模式菌株:no应用领域:产洒精培养方法培养基:53生长条件:30℃半厌氧培养 纯度:97%
Micrococcus│lysodeikticus 中文名称:溶壁微球菌Micrococcus│lysodeikticus提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:溶菌试验培养方法培养基:CM0002生长条件:28℃存储条件:真空冷冻干燥法;定期移植法 纯度:96%
Streptococcus│faecalis 中文名称:粪链球菌Streptococcus│faecalis提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:用于测定各类氨基。培养方法培养基:CM0500生长条件:28℃存储条件:真空冷冻干燥法;定期移植法 纯度:96%
克鲁斯假丝酵母品牌赖氨脱羧酶肉汤片剂 (CM0308)大麦芽3-羟基磺(含有数量不等的3,3'-氧基二烷磺)(约的水溶液,约7.8mol/L)P-GP(P-glycoprotein) P-糖蛋白抗原
W.L.营养培养基 (CM0309)厚朴酚正基三苯基溴化磷Pepsinogen C peptide 原C蛋白抗原
E.E. 肉汤 (缓冲葡萄糖亮绿胆汁肉汤) (CM0317)和厚朴酚正基三苯基溴化磷PGC-1 Alpha(peroxisome proliferator-activated receptor- Gamma coactivator 1 Alpha) 过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活子1α抗原
DNase 琼脂 (CM0321)番泻苷A4-联苯PGRN (progranulin) 颗粒蛋白前体抗原
平板计数琼脂 (CM0325)番泻苷B4-联苯PHB(Prohibitin) 抑制素/肿瘤抑制因子抗原
1号抗生素培养基(Seed 琼脂) (CM0327)番泻苷C4-联苯PKA(Protein Kinase A) 蛋白激酶A(多肽)
霍乱菌培养基TCBS (CM0333)番泻苷D2-萘甲PLAU/uPA (Plasminogen activator,urokinase) 型纤溶酶原激活因子(多肽)
Mueller-Hinton 琼脂 (CM0337)紫草素2-萘甲Podoplanin Protein 平足蛋白抗原